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现代农业科技2025年第14期动物科学·生物技术

基于稳定同位素衍生化技术的甘油磷脂分析方法研究进展

马会芳1，2王雯琪潘晓威31，2刘丽丽1，2潘政1，2叶剑芝1，2*

（中国热带农业科学院农产品加工研究所，广东湛江524001；1

2农业农村部农产品加工质量安全风险评估实验室（湛江），广东湛江524001；

3云南农业大学热带作物学院，云南普洱665099）

摘要甘油磷脂作为生物细胞膜的关键成分，在细胞膜架构组建、信号传导路径运作及物质跨膜转运流程

中发挥不可或缺的作用，深度参与众多基础生命活动的精密调控。其分子架构多元复杂，种类多样，且在生物样

本中含量少，同时易受复杂基质环境干扰，因而传统分析方法在应对甘油磷脂定性与定量检测时，难以契合高通

量、高覆盖的现代分析标准。稳定同位素衍生化技术通过测量同位素标记衍生物与未标记原物的比例，推算甘

油磷脂真实含量，克服了基质抑制效应，实现了高精度测定。在系统阐释三甲基硅烷化重氮甲烷衍生化法、丙酮

稳定同位素衍生化法、同位素稀释质谱法3种主要技术手段的基础上，对比三者的衍生化试剂、操作步骤、优缺

点及应用范围。这些方法借助稳定同位素标记衍生化试剂，提升了甘油磷脂离子化与检测性能，但受限于成本、

操作复杂性及仪器要求等。通过衍生化处理后，甘油磷脂分析在离子化、色谱分离及质谱检测灵敏度与选择性

方面的效果显著提升，有力支撑了脂质营养、疾病机制等多元领域研究，有助于拓展甘油磷脂在多学科交叉领域

的研究深度与广度，从而推动生命科学研究的精准化、深入化发展。

关键词甘油磷脂；稳定同位素衍生化技术；三甲基硅烷化重氮甲烷衍生化法；丙酮稳定同位素衍生化法；

同位素稀释质谱法；定量分析；脂质营养；研究进展

DOI：10.3969/j.issn.1007-5739.2025.14.032开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

磷脂是生物膜中非常重要的成分，甘油磷脂是磷覆盖的需求[3]。

脂中含量最多的一类，具有亲油性的酰基链和亲水性近年来，稳定同位素衍生化技术因其独特的优

的头基，是一类两亲分子[1]。甘油磷脂作为生物体内势，在甘油磷脂的定量分析研究中得到广泛应用。该

一类重要的脂质分子，在细胞膜的构成、信号传导、物技术通过引入稳定同位素标记的衍生化试剂，与甘油

质转运等方面发挥着重要作用。生物体内的甘油磷磷脂中的特定官能团反应，从而提高其离子化效率和

脂主要包括磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine，PC）、磷质谱检测灵敏度，实现对甘油磷脂的准确绝对定量分

脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine，PE）、磷脂酰丝析。随着电喷雾电离（ESI）、基质辅助激光解吸电离

氨酸（phosphatidylserine，PS）、磷脂酰甘油（phosphati‐（MALDI）、大气压化学电离（APCI）等软电离技术的发

dylglycerol，PG）、磷脂酸（phosphatidicacid，PA）、磷脂展，质谱分析已成为代谢组学分析不可或缺的手段，并

酰肌醇（phosphatidylinositol，PI）等[2]。随着脂质组学凭借其高灵敏度和高分离能力，逐渐成为最具潜力的

研究的深入，对甘油磷脂准确定量分析的需求日益增分析技术之一，可满足快速、灵敏和高选择性的检测

长。然而，甘油磷脂种类繁多，结构复杂，且存在基质要求[4]。采用高效的分离技术如高效液相色谱（HPLC）

抑制效应，传统的分析方法往往难以满足高通量和高和超高效液相色谱（UPLC）等，可以实现对甘油磷脂

的高效分离和富集。采用高灵敏度的质谱检测技术如

基金项目海南省自然科学基金项目（320QN327，321QN09

27，423QN292）；中央级公益性科研院所基本科研业务费专电喷雾串联质谱（ESI-MS/MS）和高分辨质谱（HRMS）

项（1630122024015）。