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2026年细胞培养工程师面试题及答案

一、单选题（共5题，每题2分）

1.在细胞培养过程中，下列哪种培养基最常用于悬浮培养？

A.DMEM/F12

B.F12

C.RPMI-1640

D.M199

2.细胞冻存时，常用的保护剂是？

A.FBS

B.DMSO

C.L-Glutamine

D.Penicillin

3.以下哪种方法最适合用于检测细胞培养中的支原体污染？

A.光学显微镜观察

B.PCR检测

C.荧光染色法

D.MTT法

4.在动物细胞培养中，CO2培养箱的常用CO2浓度为？

A.5%

B.10%

C.15%

D.20%

5.细胞培养基中，以下哪种成分是天然来源的？

A.HEPES

B.BSA

C.FetalBovineSerum（FBS）

D.SodiumBicarbonate

二、多选题（共5题，每题3分）

1.细胞培养过程中，以下哪些是常见的无菌操作规范？

A.超净工作台使用前需紫外灯照射30分钟

B.操作前需穿戴无菌手套和口罩

C.培养基和细胞均需高压灭菌

D.操作台面需使用70-75%酒精擦拭

2.细胞接种密度过高可能导致？

A.细胞凋亡

B.细胞分化异常

C.细胞交叉污染

D.培养基营养耗尽

3.以下哪些是细胞冻存常用的程序？

A.先在-20℃保存过夜

B.直接放入-80℃冰箱

C.使用预冷管缓慢降温

D.冻存前需调整细胞浓度

4.细胞培养中，以下哪些是常见的质量检测指标？

A.细胞活力（如MTT法）

B.细胞计数（如血球计数板）

C.细胞形态观察（如HE染色）

D.培养基pH值检测

5.以下哪些因素会影响细胞培养的上清液质量？

A.细胞状态（如贴壁或悬浮）

B.培养基成分

C.细胞密度

D.培养时间

三、简答题（共5题，每题4分）

1.简述细胞培养过程中常见的污染类型及其防治方法。

2.解释什么是“贴壁依赖性细胞”，并举例说明其培养要点。

3.描述细胞冻存和复苏的步骤，并说明关键注意事项。

4.解释培养基中“无血清培养基”的定义及其优缺点。

5.说明细胞培养过程中如何进行无菌操作，并举例说明超净工作台的使用要点。

四、论述题（共2题，每题10分）

1.结合实际工作场景，论述细胞培养过程中如何优化细胞生长条件以提高产量和质量。

2.分析细胞培养在生物医药领域的应用前景，并讨论当前面临的挑战及解决方案。

答案及解析

一、单选题答案及解析

1.D.M199

解析：M199是常用的悬浮培养培养基，适用于多种细胞系，如杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞等。其他选项如DMEM/F12、F12和RPMI-1640更多用于贴壁培养。

2.B.DMSO

解析：DMSO（二甲基亚砜）是常用的细胞冻存保护剂，能有效降低细胞内冰晶形成，提高冻存存活率。FBS是培养基添加剂，L-Glutamine是氨基酸，Penicillin是抗生素。

3.B.PCR检测

解析：PCR检测是检测支原体污染的黄金标准，灵敏度高且特异性强。光学显微镜可能无法观察到支原体，荧光染色法灵敏度较低，MTT法用于细胞活力检测。

4.A.5%

解析：CO2培养箱的常用CO2浓度为5%，通过调节pH值维持细胞最佳生长环境。其他浓度过高或过低均可能导致细胞异常。

5.C.FetalBovineSerum（FBS）

解析：FBS是天然来源的培养基添加剂，提供生长因子、激素等必需成分。HEPES是缓冲剂，BSA是人工添加剂，SodiumBicarbonate用于调节pH值。

二、多选题答案及解析

1.A.超净工作台使用前需紫外灯照射30分钟，B.操作前需穿戴无菌手套和口罩，D.操作台面需使用70-75%酒精擦拭

解析：紫外灯照射可杀灭空气中的微生物，手套和口罩防止污染，酒精擦拭消毒台面。高压灭菌适用于培养基，但非所有材料均需灭菌。

2.B.细胞分化异常，C.细胞交叉污染，D.培养基营养耗尽

解析：高密度导致细胞代谢产物积累，影响分化；交叉污染需严格无菌操作避免；营养耗尽则影响生长。细胞凋亡通常与缺氧或应激相关。

3.A.先在-20℃保存过夜，C.使用预冷管缓慢降温，D.冻存前需调整细胞浓度

解析：预冷管防止快速降温损伤细胞，-20℃至-80℃逐步冷冻更安全。细胞浓度需调整至适宜冻存密度。直接放入-80℃可能因温差过大导致细胞损伤。

4.A.细胞活力（如MTT法），B.细胞计数（如血球计数板），C.细胞形态观察（如HE染色），D.培养基pH值检测

解析：以上均为细胞培养关键检测指标，分别评估生长状态、数量、形态及培养基性能。

5.A.细胞状态（如贴壁或悬