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腺病毒颗粒数测定

D.1材料

空白溶液（病毒稀释液等），十二烷基硫酸钠（SDS），0.22μm滤器，EP管

D.2仪器设备

紫外分光光度计，台式高速离心机，恒温金属浴

D.3操作步骤

D.3.1病毒裂解液

取SDS0.1g，加入至10mL空白溶液（病毒稀释液等）中，0.22μm滤器过滤，为含

1%SDS病毒裂解液。

D.3.2空白对照溶液制备

取空白溶液900μL，加入病毒裂解液100μL，振荡混匀。

D.3.3待测品溶液制备

取待测样品900μL加入病毒裂解液100μL，振荡混匀。每个待测品制备3个平行样品

（成品分别取3支）。

D.3.4将空白对照溶液和待测品溶液置恒温金属浴55℃加热10分钟，12,000rpm离心5分

钟，取上清，置干净的EP管中，分别做好标记。

D.3.5预热仪器，将空白溶液与待测样品分别放入对应比色皿中读取260nm，280nm和320

nm值3次并记录。

D.4数据分析

D.4.1系统适用性要求

A260/A280比值符合要求（通常为1.2-1.4）。

D.4.2计算公式

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病毒颗粒数（VP/mL）＝A260×稀释倍数（样品稀释倍数×上样稀释倍数）×1.1×10，

平行试验3次，取平均值。