2025版病原体核酸快速检测专家共识：技术与应用规范.pptxVIP

（2025版）病原体核酸快速检测临床实验室规范化应用专家共识精准检测，规范操作

目录第一章第二章第三章技术原理与适用范围实验室建设标准检测流程规范化

目录第四章第五章第六章质量控制体系结果报告与解读安全与应急管理

技术原理与适用范围1.

第二季度第一季度第四季度第三季度等温扩增技术微流控芯片技术数字PCR技术CRISPR-Cas系统采用恒定温度完成核酸扩增（如LAMP、RPA等），无需热循环仪，具有设备简单、反应快速（20-40分钟）的特点，适合基层医疗机构使用。将核酸提取、扩增和检测集成于微型芯片，通过微通道实现自动化操作，显著减少人工干预和污染风险，典型检测时间控制在30分钟以内。通过微滴分割实现绝对定量，灵敏度可达单拷贝级别，特别适用于低载量病原体检测和耐药基因突变分析，但设备成本较高。利用CRISPR相关蛋白的靶向切割特性，结合荧光报告系统实现高特异性检测，可区分相近病原体亚型，适用于多重感染鉴别诊断。快速核酸检测技术分类

适用病原体类型包括流感病毒、呼吸道合胞病毒、SARS-CoV-2等，快速检测可缩短确诊时间至1小时内，显著改善抗病毒治疗时效性。呼吸道病原体针对诺如病毒、轮状病毒等，适用于爆发疫情调查和急诊腹泻病因筛查，检测灵敏度需达到10^3copies/mL以上。消化道病原体涵盖常见细菌（如金黄色葡萄球菌）和真菌（如念珠菌），要求检测系统具备全血样本直接处理能力，避免离心预处理步骤。血流感染病原体

要求检测时间≤30分钟，设备需具备急诊科环境抗干扰能力，优先用于脓毒症、脑膜炎等危急重症的病原学诊断。急诊抢救场景（A级）允许40分钟内出具结果，系统应支持批量样本连续检测（如每小时≥8样本），适用于流感季发热门诊分流。门急诊筛查场景（B级）针对长期住院患者的多重耐药菌监测，需配备数据管理系统实现结果追溯，建议每周开展2次质控。住院监测场景（C级）设备需满足CLIA-waived认证标准，操作步骤不超过3步，适合社区卫生服务中心开展结核分枝杆菌等筛查。基层初筛场景（D级）临床适用场景分级

实验室建设标准2.

01实验室必须设置明确的试剂准备区、样本处理区和扩增区，各区之间需采用物理屏障（如缓冲间或单向气流）隔离，避免气溶胶交叉污染。建议使用独立通风系统，各区气压梯度差≥5Pa。污染风险控制02实验流程应遵循试剂准备→样本处理→扩增分析的单向动线设计，严禁逆向流动。不同区域需配备专用工作服和鞋套，人员跨区移动需执行更衣程序。人员单向流动03各区域设备必须固定使用，禁止跨区混用。特别是微量加样器、离心机等高频接触设备需粘贴区域标识，扩增区设备应配备防污染滤膜。设备专用化配置04各区需配备专用生物废物容器，含扩增产物的废液需经10%次氯酸钠浸泡处理后再高压灭菌，锐器应使用防刺穿容器单独收集。废物处理规范分区物理隔离要求

核酸提取系统应选用全自动封闭式提取仪，提取效率需≥90%，交叉污染率0.1%。设备需具备原始管上样功能，支持≥8种常见样本类型（如血清、咽拭子、肺泡灌洗液等）。要求检测通道≥4个，温控精度±0.3℃，具备熔解曲线分析功能。需验证仪器在95%置信区间内的检测下限（LoD）符合厂家声明。POCT设备应满足样本进-结果出要求，检测时间≤40分钟。需配备条码扫描和LIS接口，内置质控模块需包含扩增内标和提取控制。实时荧光PCR仪快速检测设备设备配置性能规范

采用粒子计数器每月监测，≥0.5μm粒子数应≤3,520个/m3（相当于ISO8级）。扩增区需每周进行气溶胶沉降菌检测，菌落数≤4CFU/皿（90mm直径）。空气洁净度实验区温度应维持在18-25℃，相对湿度30-60%。需配备双探头记录仪实现24小时连续监控，数据保存≥2年。温湿度调控使用ATP生物荧光检测仪定期验证，清洁后台面RLU值≤200。高频接触区域（如生物安全柜内壁）需每周进行核酸残留检测。表面消毒效果每年需进行烟雾测试验证气流方向，试剂准备区相对于走廊应保持正压，扩增区相对于缓冲间保持负压，压差波动范围±10%以内。气流组织验证环境监测指标控制

检测流程规范化3.

必须使用厂家配套的专用采样管，确保样本与保存液的最佳配比，避免因容器材质差异导致核酸降解或抑制剂残留（如肝素抗凝管对PCR的抑制作用）。涉及呼吸道样本采集时，操作人员需佩戴N95口罩、护目镜及双层手套，样本装入密封袋后再置于95kPa压力可耐受的二级容器中转运，符合WHO《感染性物质运输指南》要求。不同样本类型有明确保存时限，如咽拭子在2-8℃下不超过72小时，支气管肺泡灌洗液需在采集后30分钟内处理，超时应采用核酸稳定剂或-80℃深低温冻存。标准化采集容器生物安全三级防护时效性控制样本采集转运标准

交叉污染防范采用带滤芯吸头及单向工作流设计，提取区与扩增区物理隔离，每批次完成后用1