纳米磁分离与化学发光联用：E.docxVIP

纳米磁分离与化学发光联用：E.coliO157：H7高效检测技术探究

一、引言

1.1研究背景与意义

1.1.1E.coliO157：H7的危害

大肠杆菌（Escherichiacoli）作为人和动物肠道中的常居菌，多数情况下并不会对机体造成危害，甚至在维持肠道微生态平衡等方面发挥着积极作用。然而，其中的E.coliO157：H7血清型菌株却具有很强的致病性，是肠出血性大肠杆菌（EHEC）的代表菌株，在食品安全领域引发了广泛关注。

E.coliO157：H7引发的食源性疾病案例屡见不鲜，给人类健康带来了严重威胁。1982年，美国首次在因食用汉堡包引起食物中毒的病人粪便中分离出E.coliO157：H7。此后，其引发的感染事件在全球范围内频繁发生。1996年，日本暴发了大规模的E.coliO157：H7食物中毒事件，波及40多个府县，患者累计达9000余人，7人死亡，此次事件主要是由污染的萝卜苗及牛肉导致。2024年，美国多个州报告因食用胡萝卜引发的大肠杆菌感染病例，其中有1人死亡。在中国，虽然大规模暴发流行相对较少，但散发病例也时有出现。例如，2021年河南新乡封丘县戚城中学30多名学生在食用学校营养午餐后出现呕吐、腹泻症状，食品留样中部分样本检出大肠杆菌及大肠杆菌群含量超标。

E.coliO157：H7的致病物质主要包括类志贺毒素（VT）、质粒O157等。类志贺毒素由一个A亚单位和5-6个B亚单位组成，B亚单位与宿主肠壁细胞糖脂受体结合，使得具有毒素活性的A亚单位得以进入细胞，进而改变60s核糖体的组分，干扰蛋白质的合成，最终导致细胞损伤。感染者的临床表现差异较大，轻者可能仅出现轻度腹泻，而重者则可能发展为出血性结肠炎（HC）、溶血性尿毒综合征（HUS）、血栓性血小板减少性紫癜（TTP）等严重疾病。其中，HUS病程凶险，易造成急性肾衰竭乃至死亡，对儿童和老年人等弱势群体的危害尤为严重。

1.1.2检测技术的重要性

由于E.coliO157：H7的严重危害性，快速、准确地检测该病菌对于保障食品安全和维护公共卫生具有至关重要的意义。在食品安全方面，食品生产、加工和销售的各个环节都可能受到E.coliO157：H7的污染。从源头的农产品种植、养殖环境，到加工过程中的交叉污染，再到销售环节的储存条件不当等，都为病菌的传播提供了机会。如果不能及时检测出食品中的E.coliO157：H7，一旦被消费者误食，就可能引发食源性疾病的爆发，不仅会损害消费者的身体健康，还会对食品企业的声誉和经济效益造成巨大冲击，甚至影响整个食品行业的稳定发展。

在公共卫生领域，及时检测和监控E.coliO157：H7有助于预防疫情的扩散。通过对环境样本（如水源、土壤等）、动物样本以及疑似感染人群的检测，可以快速发现潜在的感染源，采取有效的防控措施，如隔离患者、消毒环境、追踪传播途径等，从而避免疫情的进一步蔓延，保护公众的健康安全。快速检测技术还能够为临床诊断和治疗提供及时的依据，有助于患者的早期诊断和治疗，提高治愈率，降低死亡率。

1.2研究目的与创新点

1.2.1研究目的

本研究旨在基于纳米磁分离和化学发光技术，建立一种高灵敏、快速的检测E.coliO157：H7的方法。通过深入研究纳米磁分离技术中磁性纳米颗粒的制备和表面改性方法，优化其对E.coliO157：H7的特异性捕获能力；同时，对化学发光技术的反应体系和条件进行优化，提高检测的灵敏度和准确性。最终实现对食品、环境等复杂样本中低浓度E.coliO157：H7的快速、准确检测，为食品安全监测和公共卫生防控提供有效的技术支持。

1.2.2创新点

在纳米磁分离技术方面，本研究首次尝试使用新型的改性剂来制备磁性纳米颗粒。传统的改性剂如油酸在与甲基丙烯酸甲酯聚合时存在耗时长、聚合过程中Fe?O?破乳团聚严重、有结块产生、包埋有单体的磁性颗粒产率低以及修饰过程有毒性等问题。而本研究选用的改性剂具有独特的结构和性能，有望解决上述问题，提高磁性纳米颗粒的制备效率和质量，增强其对E.coliO157：H7的捕获能力。

在化学发光技术方面，目前国外已有一些采用高效化学发光体系的试剂盒，但价格高昂，限制了其广泛应用。本研究将致力于优化国产化学发光试剂，利用国产的3-(2’-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3”-羟基)苯-1，2-二氧杂环丁烷磷酸（AMPPD）固体粉剂，建立并优化化学发光的条件，实现化学发光试剂的国产化，降低检测成本，同时提高检测的灵敏度和稳定性，使其能够满足实际检测的需求。