框架核酸平台下Pt-DNA与HMGB1蛋白相互作用的深度剖析与机制洞察.docxVIP

框架核酸平台下Pt-DNA与HMGB1蛋白相互作用的深度剖析与机制洞察

一、引言

1.1研究背景与意义

癌症作为全球范围内严重威胁人类健康的重大疾病之一，一直是医学和生物学领域研究的重点。在众多癌症治疗手段中，化疗占据着至关重要的地位，而铂类药物则是化疗药物中的关键成员。自1965年顺铂被发现具有抗肿瘤活性以来，铂类药物不断发展，从第一代顺铂，到第二代卡铂、奈达铂，再到第三代奥沙利铂、洛铂等，已成为治疗肺癌、消化道肿瘤、妇科肿瘤等多种恶性肿瘤的基石药物。铂类药物的主要作用机制是进入肿瘤细胞后，其中心铂原子与DNA碱基（主要是鸟嘌呤N7位点）结合，形成链内交联、链间交联以及DNA-蛋白质交联，导致DNA双螺旋结构扭曲，进而干扰DNA的复制和转录，最终诱导肿瘤细胞凋亡。然而，铂类药物在临床应用中也面临着诸多挑战，如耐药性的产生、严重的毒副作用等，这些问题限制了其治疗效果和患者的生存质量。深入研究铂类药物与生物分子的相互作用机制，对于克服耐药性、开发新型铂类药物以及优化治疗方案具有重要的理论和实践意义。

高迁移率族蛋白B1（HMGB1）是一种在生物体内广泛表达且具有重要功能的蛋白质。在细胞内，HMGB1作为一种非组蛋白核蛋白，参与DNA修复、染色体维持和细胞周期调节等多种关键过程。当细胞受到损伤、应激或发生坏死时，HMGB1会被释放到细胞外，此时它作为一种危险相关分子模式（DAMP）分子，与细胞表面的受体如晚期糖基化终产物受体（RAGE）、Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）等结合，激活细胞内的信号通路，如核因子-κB（NF-κB）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）级联反应，从而引发炎症反应、调节免疫应答，并在组织损伤修复和肿瘤发生发展等过程中发挥关键作用。研究表明，HMGB1在多种疾病状态下表达异常，包括脓毒症、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、系统性红斑狼疮以及癌症等，其在肿瘤中的高表达与肿瘤的侵袭、转移、血管生成以及免疫逃逸密切相关。因此，HMGB1不仅是疾病诊断和预后评估的重要生物标志物，也是极具潜力的治疗靶点。

鉴于铂类药物在癌症治疗中的核心地位以及HMGB1在疾病发生发展中的关键作用，研究铂-DNA（Pt-DNA）与HMGB1蛋白之间的相互作用具有深远的意义。一方面，这种相互作用可能直接影响铂类药物对肿瘤细胞的杀伤效果，深入了解其机制有助于揭示铂类药物耐药的分子基础，为克服耐药性提供新的策略。另一方面，HMGB1作为细胞内外信号传导的关键分子，与Pt-DNA的相互作用可能引发一系列细胞生物学效应，影响肿瘤细胞的命运以及肿瘤微环境，这将为癌症治疗提供新的思路和靶点。通过对Pt-DNA与HMGB1蛋白相互作用的研究，有望为开发更高效、低毒的癌症治疗方法奠定基础，推动癌症治疗领域的发展。

1.2研究现状

1.2.1铂类药物的研究进展

铂类药物进入细胞的方式一直是研究的热点之一。早期研究认为铂主要通过被动运输扩散进入细胞，药物浓度是影响细胞内铂积累的关键因素。在水溶液中，顺铂经历多步水合作用，氯离子基团被水配基取代，形成阳离子水合化合物。由于细胞内低氯离子浓度环境，顺铂水衍生物难以扩散出细胞，直至与DNA结合，这也使得顺铂具有较大的细胞生理毒性。然而，近年来一系列实验表明，铂类药物进出细胞还存在主动运输和促进运输机制。铜转运蛋白（CTR1）被证实是主要的质膜转运体，酵母细胞和小鼠细胞实验显示，CTR1的缺失会导致细胞内顺铂类药物含量下降。此外，铜外排转运体ATP7A和ATP7B也参与调节铂类药物的细胞内积累。有机阳离子转运体（OCTs）也与铂化合物进出细胞的能力有关，OCTs可以调控细胞对阳离子物种的摄取，在顺铂可能引起毒副作用的人体组织如肝和肾中表达。在人体肾脏中，顺铂的摄取受OCT2调控，且OCT酶还可抑制顺铂导致的细胞死亡，但OCT1/2只会增加奥沙利铂在细胞内的积累，对顺铂和卡铂无此作用。

当铂类药物进入细胞后，会与DNA结合形成Pt-DNA加和物。铂类药物的中心铂原子主要与DNA碱基中的鸟嘌呤N7位点结合，形成链内交联（占70%-90%）、链间交联（10%-15%）及DNA-蛋白质交联。这些交联结构会导致DNA双螺旋结构扭曲，从而干扰DNA的复制、转录等过程，最终诱导肿瘤细胞凋亡。不同铂类药物形成的Pt-DNA加和物结构和稳定性存在差异，这可能影响其抗肿瘤活性和耐药性。例如，顺铂形成的Pt-DNA加和物相对较为稳定，而奥沙利铂形成的加和物在结构上有其独特之处，这使得奥沙利铂对一些顺铂耐药的细胞株仍具有毒性。研