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  • 2026-01-05 发布于湖南
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病理细胞学制片课件

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目录

01

制片技术基础

02

细胞样本采集

03

细胞固定与染色

04

显微镜下的观察

05

制片质量控制

06

制片技术的创新

制片技术基础

01

制片流程概述

病理细胞学制片的第一步是采集组织样本,通常通过手术或活检进行。

样本采集

采集后的样本需立即固定以保持细胞形态,随后进行脱水处理,为包埋做准备。

固定与脱水

脱水后的组织块被包埋在石蜡中,然后切成薄片,以便在显微镜下观察。

包埋与切片

切片经过染色处理以增强细胞结构的对比度,最后用封片剂固定在载玻片上。

染色与封片

常用制片设备

切片机用于将组织样本切成薄片,以便在显微镜下观察,是病理学研究不可或缺的设备。

切片机

离心机在制片过程中用于分离细胞或组织碎片,确保样本的纯净度和质量。

离心机

染色设备用于对组织切片进行染色,以增强细胞结构的对比度,便于识别和分析。

染色设备

制片材料介绍

常用的固定液包括福尔马林和酒精,它们能够保持细胞形态,便于后续的组织处理和染色。

组织固定液

苏木精和伊红是病理学中最常用的染色剂,用于区分细胞的不同结构和成分。

染色剂

石蜡和树脂是组织包埋的常用材料,它们使组织块硬化,便于切片和显微镜观察。

组织包埋剂

01

02

03

细胞样本采集

02

采集方法

使用细针穿刺技术从组织中吸取细胞样本,常用于乳腺、淋巴结等部位。

细针穿刺

01

02

通过外科手术直接切除病变组织,获取大量细胞样本,适用于肿瘤等较大病变。

手术切除

03

使用刮片工具在病变部位轻轻刮取细胞,常用于宫颈癌筛查等妇科检查。

刮片取样

采集注意事项

在采集细胞样本时,必须严格遵守无菌操作原则,避免样本污染,确保实验结果的准确性。

无菌操作原则

采集后的样本应立即放入适宜的保存液中,并在规定时间内运输至实验室,以保持细胞活性。

样本保存与运输

详细记录患者信息和样本采集时间,确保样本的可追溯性,便于后续的病理分析和诊断。

患者信息记录

样本保存与运输

在实验室条件下,细胞样本通常保存在4°C的冰箱中,以保持其活性和结构完整性。

样本的短期保存

细胞样本在运输过程中需保持恒温,通常使用干冰或特殊保温箱确保样本不受温度波动影响。

样本的运输条件

细胞样本可通过液氮冷冻或使用冷冻保护剂进行深低温保存,以备长期研究使用。

样本的长期保存

细胞固定与染色

03

固定剂的选择

乙醇固定剂适用于多种细胞,能够快速渗透细胞,保持细胞形态,常用于常规组织学检查。

乙醇固定剂

甲醛固定剂能与蛋白质形成交联,保持组织结构,广泛应用于病理诊断,但可能影响某些抗原的检测。

甲醛固定剂

冰冻切片固定剂如丙酮或甲醇,用于快速固定组织,适用于需要保持抗原活性的免疫组化研究。

冰冻切片固定剂

福尔马林固定剂是广泛使用的固定剂之一,能长时间保存组织样本,但可能引起组织硬化,影响细胞细节。

福尔马林固定剂

染色技术原理

01

细胞膜通透性改变

染色过程中,细胞膜的通透性被改变,使得染料分子能够进入细胞内部。

02

染料与细胞成分特异性结合

特定的染料分子与细胞内的核酸、蛋白质等成分发生特异性结合,形成可见的染色效果。

03

染色剂的电荷作用

染色剂的正负电荷与细胞内带电分子相互作用,增强染色对比度,便于显微镜观察。

常见染色方法

HE染色是病理学中最常用的染色技术,用于观察细胞核和细胞质的结构差异。

苏木精-伊红染色法(HE染色)

01

吉姆萨染色常用于血液涂片,能够清晰显示白细胞的种类和形态特征。

吉姆萨染色法

02

Pap染色主要用于宫颈癌筛查,能够突出显示细胞核和细胞质的细微结构。

Papanicolaou染色法

03

该方法用于区分结缔组织中的胶原纤维、肌肉纤维和细胞核,常用于组织学研究。

Masson三色染色法

04

显微镜下的观察

04

显微镜操作技巧

在显微镜下观察时,应先用低倍镜粗调,再用高倍镜细调,避免损坏样本或镜头。

正确调节焦距

选择合适的光源强度和滤光片,以获得最佳的图像对比度和清晰度,保护眼睛。

使用适宜的光源

在观察过程中,确保样本保持湿润,避免干燥导致的细胞形态变化或样本损坏。

保持样本湿润

细胞结构识别

细胞核的辨识

01

通过显微镜观察,细胞核呈现为细胞内最明显的深染区域,通常位于细胞中央。

细胞质的特征

02

细胞质是细胞核外的区域,包含多种细胞器,如线粒体、内质网等,通过染色可清晰辨认。

细胞膜的观察

03

细胞膜是细胞的外层边界,通常在显微镜下呈现为薄而清晰的线条,围绕整个细胞。

病理变化分析

观察细胞大小、形状的改变,如肿瘤细胞的异型性,是诊断病理变化的重要依据。

细胞形态异常

细胞核内染色质分布异常,如染色质凝聚或边缘化,提示细胞可能经历凋亡或坏死过程。

染色质分布不均

显微镜下可见正常组织结构被破坏,细胞排

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