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基于DNA-SIP技术解析反硝化除磷和SND过程菌群结构：原理、应用与展望

一、引言

1.1研究背景与意义

水是生命之源，然而，随着工业化和城市化的快速发展，水污染问题日益严重，对人类健康和生态环境构成了巨大威胁。大量未经处理或处理不达标的污水直接排放，导致水体富营养化、溶解氧降低、生物多样性减少等一系列问题。水体富营养化引发的蓝藻爆发等现象，不仅破坏了水生态系统的平衡，还会产生藻毒素，对饮用水安全造成严重影响。据统计，全球每年有大量的人口因饮用受污染的水而患病，甚至失去生命。因此，高效的污水处理技术对于保护水资源、维护生态平衡和保障人类健康至关重要。

在污水处理过程中，氮和磷是需要重点去除的污染物。传统的污水处理技术在去除有机物方面取得了一定成效，但对于氮、磷等营养物质的去除效果往往不尽如人意。反硝化除磷技术作为一种新型的污水处理技术，能够在同一系统中同时实现脱氮和除磷，具有节省碳源、降低能耗和减少污泥产量等优点。其原理是利用反硝化聚磷菌（DPAOs）在厌氧条件下释磷并储存碳源，在缺氧条件下以硝酸盐作为电子受体进行吸磷和反硝化，从而达到同步脱氮除磷的目的。这一技术的应用，不仅能有效提高污水处理效率，还能降低处理成本，为解决水体富营养化问题提供了新的途径。

同步硝化反硝化（SND）技术也是污水处理领域的研究热点之一。该技术打破了传统生物脱氮理论中硝化和反硝化需在不同条件和空间进行的限制，能够在同一反应器内同时进行硝化和反硝化反应，从而减少反应器体积、节省基建费用、提高脱氮效率。SND技术的实现，主要基于宏观环境中反应器内溶解氧分布不均、微环境理论（如活性污泥絮体或生物膜内部存在氧浓度梯度，形成好氧和缺氧区域）以及生物学因素（如好氧反硝化菌和异养硝化菌的存在）。这一技术的应用，对于优化污水处理工艺、提高污水处理效果具有重要意义。

微生物在反硝化除磷和SND过程中起着关键作用，不同的菌群结构和功能直接影响着处理效果。深入了解菌群结构，有助于揭示反硝化除磷和SND的作用机制，为优化工艺参数、提高处理效率提供理论依据。传统的微生物研究方法，如培养法，存在局限性，只能培养出环境中一小部分微生物，无法全面反映微生物群落的真实情况。而DNA-SIP（DNA-StableIsotopeProbing，DNA-稳定同位素探针）技术的出现，为解析菌群结构提供了新的有力工具。

DNA-SIP技术能够将稳定同位素标记的底物添加到环境样品中，通过追踪底物被微生物吸收并整合到DNA中的情况，从而准确地识别出参与特定代谢过程的微生物群落。该技术无需对微生物进行纯培养，能够直接在原位环境中研究微生物的功能和生态，为深入了解反硝化除磷和SND过程中的菌群结构和功能提供了独特的视角，有助于发现新的功能微生物，为污水处理技术的创新和优化奠定基础。

1.2国内外研究现状

在反硝化除磷方面，国内外学者已经进行了大量的研究。在机理研究上，对反硝化聚磷菌的代谢途径和生理特性有了较为深入的认识。研究表明，反硝化聚磷菌在厌氧条件下，利用细胞内的聚磷酸盐（Poly-P）水解产生的能量，将外界的挥发性脂肪酸（VFA）等有机物摄入细胞内，合成聚羟基烷酸（PHA），同时释放磷酸盐（PO43--P）；在缺氧条件下，以硝酸盐为电子受体，分解PHA产生能量，用于吸收磷酸盐并合成Poly-P，从而实现同步脱氮除磷。在微生物种群研究方面，通过FISH（荧光原位杂交）和PCR（聚合酶链式反应）等技术，发现CandidatusAccumulibacterphosphatis是反硝化除磷过程中的关键菌群之一，此外，Microlunatusphosphovorus、Actinobacteria、Purplenonsulfurbacteria、Tetrasphaera、Dechloromonas等种群也被证实具有反硝化除磷功能。

在工艺研究方面，开发了多种基于反硝化除磷原理的工艺，如单污泥工艺中的A2/O工艺、UCT工艺和BCFs工艺，以及双污泥工艺等。单污泥工艺具有流程简单、易于操作等优点，但反硝化除磷率相对较低；双污泥工艺的反硝化除磷率较高，但工艺流程较为复杂，限制了其实际工程应用。目前，研究重点主要集中在如何提高单污泥工艺的反硝化除磷率，以及简化双污泥工艺流程，同时优化工艺运行条件，如碳源投加、污泥龄控制、溶解氧浓度调节等，以提高反硝化除磷技术在污水处理中的应用效果。

对于SND过程菌群结构的研究，也取得了一定的进展。在机理研究方面，宏观环境理论认为，反应器内溶解氧分布不均，会形成局部的好氧和缺氧区域，为硝化菌和反硝化菌提供了各自适宜的生存环境，从而实现同步硝化反硝化。微环境理论指出，在活