PCR上岗证考试题库及答案.docxVIP

PCR上岗证考试题库及答案

姓名：__________考号：__________

一、单选题(共10题)

1.PCR技术的基本原理是什么？()

A.分子杂交

B.DNA复制

C.酶联免疫吸附

D.电泳分析

2.PCR反应体系中必须包含哪些成分？()

A.酶、引物、模板DNA、dNTPs、缓冲液

B.酶、引物、模板DNA、dNTPs、DNA聚合酶

C.酶、引物、模板DNA、dNTPs、PCR缓冲液

D.酶、引物、模板DNA、dNTPs、核酸

3.PCR反应过程中，哪个阶段发生变性？()

A.复制阶段

B.延伸阶段

C.解链阶段

D.合成阶段

4.PCR反应中，哪个酶的耐热性最强？()

A.Taq聚合酶

B.Klenow片段

C.T7聚合酶

D.Pfu聚合酶

5.PCR产物鉴定通常采用什么方法？()

A.Southernblot

B.Northernblot

C.Westernblot

D.DNA测序

6.PCR反应中，引物的设计应遵循哪些原则？()

A.引物长度适中，GC含量在40%-60%之间，避免二级结构，5端和3端避免与模板DNA互补

B.引物长度适中，GC含量在40%-60%之间，避免二级结构，5端和3端避免与模板DNA互补，上下游引物之间避免互补

C.引物长度适中，GC含量在40%-60%之间，避免二级结构，上下游引物之间避免互补

D.引物长度适中，GC含量在40%-60%之间，避免二级结构，5端和3端避免与模板DNA互补，上下游引物之间避免互补，上下游引物之间距离较近

7.PCR反应中，如何避免引物二聚体形成？()

A.选择合适的引物长度，优化退火温度，使用非互补引物

B.选择合适的引物长度，优化退火温度，使用互补引物

C.选择合适的引物长度，优化退火温度，使用Taq聚合酶

D.选择合适的引物长度，优化退火温度，使用Klenow片段

8.PCR反应中，如何提高扩增效率？()

A.使用高浓度的dNTPs，提高退火温度，增加循环次数

B.使用低浓度的dNTPs，降低退火温度，减少循环次数

C.使用高浓度的dNTPs，降低退火温度，增加循环次数

D.使用低浓度的dNTPs，提高退火温度，减少循环次数

9.PCR反应中，如何避免非特异性扩增？()

A.使用高浓度的dNTPs，提高退火温度，增加循环次数

B.使用低浓度的dNTPs，降低退火温度，减少循环次数

C.使用高浓度的dNTPs，降低退火温度，增加循环次数

D.使用低浓度的dNTPs，提高退火温度，减少循环次数

10.PCR反应中，如何处理PCR产物？()

A.直接进行测序分析

B.通过琼脂糖凝胶电泳检测，回收目的片段，进行后续实验

C.通过琼脂糖凝胶电泳检测，直接进行后续实验

D.通过琼脂糖凝胶电泳检测，回收目的片段，进行测序分析

二、多选题(共5题)

11.PCR反应中，以下哪些因素会影响扩增效率？()

A.引物设计

B.模板DNA浓度

C.Taq聚合酶的活性

D.循环次数

E.退火温度

12.PCR反应中，以下哪些是PCR反应的必要成分？()

A.dNTPs

B.引物

C.模板DNA

D.Taq聚合酶

E.缓冲液

13.PCR反应中，以下哪些方法可以减少非特异性扩增？()

A.使用非互补引物

B.优化退火温度

C.使用高浓度的dNTPs

D.降低循环次数

E.使用低浓度的dNTPs

14.PCR反应后，以下哪些方法可以用于检测PCR产物？()

A.琼脂糖凝胶电泳

B.Southernblot

C.Northernblot

D.DNA测序

E.Westernblot

15.PCR反应中，以下哪些因素可能导致PCR失败？()

A.引物设计不当

B.模板DNA质量差

C.Taq聚合酶活性不足

D.反应体系污染

E.缓冲液配置错误

三、填空题(共5题)

16.PCR技术全称是______。

17.在PCR反应中，______是DNA合成的关键。

18.PCR反应的基本步骤包括______、______和______。

19.PCR反应中，______是扩增DNA的关键。

20.PCR反应的退火温度通常在______℃左右。

四、判断题(共5题)

21.PCR技术可以在没有任何模板DNA的情况下进行。()

A.正确B.错误

22.Taq聚合酶的活性在PCR反应中不是非常重要。()

A.正确B.错误

23