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电穿孔转化参数设定试题库及答案
单项选择题(每题2分,共10题)
1.电穿孔转化中,通常电压范围是()
A.10-100VB.100-1000VC.1000-5000VD.5000-10000V
答案:C
2.电穿孔转化时,电容大小会影响()
A.细胞生长B.电场强度C.脉冲时间D.转化效率
答案:D
3.适合大多数细菌电穿孔转化的电阻是()
A.200ΩB.400ΩC.600ΩD.800Ω
答案:C
4.电穿孔转化中,样品与电极距离一般是()
A.1mmB.2mmC.3mmD.4mm
答案:B
5.电穿孔转化前,细胞需要处于()状态
A.对数生长期B.稳定期C.衰亡期D.延迟期
答案:A
6.电穿孔转化使用的缓冲液一般是()
A.PBSB.Tris-HClC.水D.专用电穿孔缓冲液
答案:D
7.提高电穿孔转化效率,可适当()
A.增加电压B.减少细胞浓度C.延长脉冲时间D.降低温度
答案:A
8.电穿孔转化大肠杆菌常用的电压是()
A.1200VB.1600VC.2000VD.2400V
答案:B
9.电穿孔转化哺乳动物细胞时,电压相对()
A.较低B.较高C.与细菌相同D.不确定
答案:A
10.电穿孔转化的脉冲类型多为()
A.方波B.正弦波C.三角波D.不规则波
答案:A
多项选择题(每题2分,共10题)
1.影响电穿孔转化参数设定的因素有()
A.细胞类型B.质粒大小C.缓冲液成分D.电极材质
答案:ABC
2.电穿孔转化参数包含()
A.电压B.电容C.电阻D.脉冲时间
答案:ABCD
3.设定电穿孔转化电压时需考虑()
A.细胞耐受程度B.转化效率要求C.仪器最大功率D.环境温度
答案:AB
4.优化电穿孔转化参数的方法有()
A.预实验B.参考文献C.改变细胞状态D.更换缓冲液
答案:ABCD
5.电穿孔转化中,电容对结果的影响包括()
A.影响脉冲强度B.影响脉冲时间C.影响细胞存活率D.影响转化子数量
答案:ABCD
6.不同细胞进行电穿孔转化时,参数差异体现在()
A.电压B.电容C.脉冲次数D.细胞浓度
答案:ABCD
7.电穿孔转化中,合适的电阻作用有()
A.稳定电流B.控制脉冲形状C.提高转化效率D.保护仪器
答案:ABC
8.脉冲时间对电穿孔转化的影响有()
A.过短不利于DNA进入细胞B.过长细胞易死亡
C.合适时间可提高转化效率D.不影响转化结果
答案:ABC
9.选择电穿孔转化缓冲液需考虑()
A.离子强度B.导电性C.对细胞的毒性D.颜色
答案:ABC
10.电穿孔转化参数优化目标是()
A.提高转化效率B.保持细胞活性C.降低成本D.缩短操作时间
答案:AB
判断题(每题2分,共10题)
1.电穿孔转化参数设定只与细胞类型有关。()
答案:错
2.电压越高,电穿孔转化效率一定越高。()
答案:错
3.电穿孔转化中电容大小不影响脉冲时间。()
答案:错
4.所有细胞电穿孔转化的电阻设定都一样。()
答案:错
5.电穿孔转化前细胞处于任何时期都可以。()
答案:错
6.电穿孔转化必须使用专用缓冲液。()
答案:对
7.降低脉冲时间能提高细胞存活率。()
答案:对
8.电穿孔转化参数设定好后无需调整。()
答案:错
9.改变电极距离不会影响电穿孔转化效果。()
答案:错
10.参考他人电穿孔转化参数一定能成功。()
答案:错
简答题(每题5分,共4题)
1.简述影响电穿孔转化参数设定的主要因素。
答案:主要因素有细胞类型,不同细胞对电穿孔耐受不同;质粒大小,影响进入细胞难度;缓冲液成分,影响导电性等;此外还有电极距离、细胞浓度等也会影响参数设定。
2.说明优化电穿孔转化参数的一般步骤。
答案:首先进行预实验,设置不同参数组合测试。参考相关文献了解同类细胞或相似实验的参数。根据预实验结果调整参数,如转化效率低,适当提高电压等,直至找到较优参数。
3.为什么电压过高会降低电穿孔转化效率?
答案:电压过高时,细胞膜虽能形成较大孔洞,但过大的电场力会对细
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