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第三节高速逆流色谱分离技术化学系1303班2

目录概述1工作原理2溶剂系统的选择3应用4

一、概述高速逆流色谱（High-SpeedCountercurrentChromatography,HSCCC）是一种连续高效的液-液分配色谱分离技术。该技术不需要固体支撑体，主要依据物质在两相中分配系数的不同对物质进行分离，相对其他常用色谱（如柱色谱、高效液相色谱等）来说，具有无不可逆吸收和回收率高的特点，特别适合于天然活性成分的分离。

选择溶剂体系平衡选择固定相充满螺旋管柱高速旋转螺旋管泵入流动相流动相流出，注入带分离的样品收集馏分

2、HSCCC色谱的特点①应用范围广，适应性好②操作简便，容易掌握③重现性好，回收率高④分离效率高，分离量较大⑥产品纯度高

三、溶剂系统的选择1、溶剂系统的种类：①弱极性溶剂体系②中等极性溶剂体系③强极性溶剂体系

2、溶剂体系选择的步骤（1）预测要分离物质的极性，粗选一个溶剂体系；（2）取少量样品于上下相各2毫升的溶剂体系中，用TLC进行检测，可加入甲醇、乙醇、醋酸乙酯等来调节溶剂体系的极性，直到样品在上下相中的分配比K为0.5~2为止；（3）用HPLC测定K值；（4)用分析型HSCCC进行预分离，再用制备型高速逆流色谱进行分离。

四、应用高速逆流色谱在分离纯化木蝴蝶中的黄酮苷类化合物的应用1、分配系数的测定利用HPLC测定样品在不同溶剂体系的分配系数。

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