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芝麻转双价抗虫基因的花粉介导与农杆菌介导法比较研究
一、引言
1.1研究背景
芝麻(SesamumindicumL.)作为世界上重要的油料作物之一,在农业领域占据着关键地位。其种子含油量高达50%-60%,且富含蛋白质、维生素E、芝麻素等多种营养成分,具有极高的食用和药用价值,被广泛应用于食品、医药、化妆品等多个行业。在全球范围内,芝麻种植历史悠久,种植区域广泛分布于亚洲、非洲、美洲等地区。亚洲作为芝麻的主要产区,印度、中国、缅甸等国家的芝麻种植面积和产量均位居世界前列。在中国,芝麻种植遍布河南、湖北、安徽、江西等多个省份,是当地农业经济的重要组成部分。
然而,芝麻在生长过程中面临着诸多虫害的威胁,严重影响其产量和品质。据统计,每年因虫害导致的芝麻减产可达20%-50%,甚至在某些虫害爆发严重的年份和地区,减产幅度更为惊人,给芝麻种植户带来了巨大的经济损失。常见的芝麻害虫包括棉铃虫、蚜虫、芝麻天蛾、荚野螟等。棉铃虫以幼虫蛀食芝麻的花、蒴果和嫩茎,造成落花落蒴,阻碍籽粒灌浆,导致芝麻产量大幅下降;蚜虫则群集在芝麻嫩叶、花序上吸食汁液,使叶片卷曲畸形,不仅影响芝麻的光合作用和生长发育,还会传播病毒病,进一步降低芝麻的品质和产量;芝麻天蛾食量巨大,主要以啃食芝麻叶片为生,严重削弱植株的光合作用能力,导致芝麻籽粒瘪小,影响最终的收成;荚野螟幼虫吐丝缠绕植株叶面,并钻入蒴果蛀食种子,致使蒴果变黑脱落,籽粒被吃空,对芝麻的产量和质量造成严重破坏。
传统的芝麻抗虫方法主要依赖化学农药防治,但化学农药的长期大量使用带来了一系列严重问题。一方面,化学农药在杀死害虫的同时,也会对环境造成污染,破坏生态平衡,对土壤、水源和非靶标生物产生负面影响;另一方面,长期使用化学农药会导致害虫产生抗药性,使得农药的防治效果逐渐降低,进一步加大了农药的使用量和使用频率,形成恶性循环。此外,化学农药残留还会对食品安全构成威胁,危害人类健康。因此,寻找一种绿色、高效、可持续的芝麻抗虫方法迫在眉睫。
利用基因工程技术将双价抗虫基因导入芝麻,培育具有自主抗虫能力的芝麻新品种,为解决芝麻虫害问题提供了新的途径。双价抗虫基因是指将两种不同作用机制的抗虫基因同时导入植物,使其具备更广泛、更持久的抗虫能力。与单一抗虫基因相比,双价抗虫基因可以通过不同的作用方式协同抵抗害虫,有效延缓害虫抗性的产生,提高芝麻对多种害虫的综合抗性。这种方法不仅能够减少化学农药的使用,降低对环境和人类健康的危害,还能从根本上提高芝麻的抗虫能力,保障芝麻的产量和品质,对于推动芝麻产业的可持续发展具有重要意义。
1.2芝麻抗虫研究现状
目前,芝麻抗虫研究主要集中在传统育种和生物技术手段两个方面。传统育种方法是通过对芝麻种质资源进行筛选、杂交、回交等操作,选育具有抗虫性状的芝麻品种。例如,科研人员通过广泛收集不同地区的芝麻种质资源,对其进行抗虫性鉴定,筛选出具有一定抗虫能力的材料,然后通过有性杂交将抗虫基因聚合到优良品种中。这种方法在一定程度上提高了芝麻的抗虫性,但其周期长、效率低,且受到种质资源有限和抗虫基因挖掘难度大等因素的限制,难以满足快速发展的芝麻产业对高抗虫品种的需求。
随着生物技术的飞速发展,利用基因工程技术进行芝麻抗虫研究成为当前的热点。基因工程技术可以打破物种间的生殖隔离,将来自不同生物的抗虫基因导入芝麻中,赋予芝麻全新的抗虫特性。目前,在芝麻抗虫基因工程研究中,常用的抗虫基因包括苏云金芽孢杆菌内毒素基因(Bt基因)、蛋白酶抑制剂基因、凝集素基因等。Bt基因能够编码产生一种具有杀虫活性的晶体蛋白,当害虫取食含有Bt基因的植物组织后,晶体蛋白在害虫肠道内被激活,与肠道上皮细胞表面的特异性受体结合,导致细胞膜穿孔,细胞裂解,最终使害虫死亡。蛋白酶抑制剂基因编码的蛋白酶抑制剂可以抑制害虫体内蛋白酶的活性,阻碍害虫对食物中蛋白质的消化和吸收,从而影响害虫的生长发育和繁殖。凝集素基因编码的凝集素能够与害虫肠道上皮细胞表面的糖蛋白结合,干扰害虫的消化和吸收功能,还能影响害虫的神经系统和免疫系统,起到抗虫作用。
在芝麻转抗虫基因的方法上,主要有农杆菌介导法、基因枪法、花粉介导法等。农杆菌介导法是利用农杆菌将外源基因导入植物细胞,具有操作简单、成本低、外源基因整合位点相对稳定等优点,是目前应用最为广泛的转基因方法之一。基因枪法是通过高速粒子将外源基因直接导入植物细胞,不受植物种类和基因型的限制,但存在外源基因拷贝数高、易发生基因沉默等问题。花粉介导法是利用花粉作为载体,将外源基因导入植物受精卵,具有操作简便、无需组织培养等优点,但转化率相对较低,技术稳定性有待提高。
转双价抗虫基因在芝麻抗虫研究中具有重要的发展前景。通过将两种不同作用机制的抗虫基因同时导入芝麻,可以扩大芝麻的抗虫谱
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