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诸葛菜不同形态类型的遗传多样性解析：分子与表型视角

一、引言

1.1研究背景与意义

诸葛菜（Orychophragmusviolaceus(L.)O.E.Schulz），隶属十字花科诸葛菜属，是一年生或二年生草本植物，又名二月蓝、紫金菜、菜子花等。相传，诸葛亮率领蜀军北伐时，因军粮不足，便命士兵广泛种植此菜以解决粮草问题，诸葛菜由此得名。该植物在中国分布广泛，涵盖东北、华北、西北、华东、华中等地，国外主要分布于韩国、朝鲜等地，多生长在平原、山地、路旁或地边。诸葛菜具有诸多优良特性，其喜温暖湿润气候，同时具备抗盐碱、耐旱、耐寒以及适应性强等特点。

从食用角度来看，诸葛菜味清香、营养丰富，蛋白质、胡萝卜素和维生素C等含量颇高，可进行炒食、凉拌及烧汤，在战时还能作为救急野菜。特别是其亚油酸比例较高，亚油酸能够降低人体内血清胆固醇和甘油三酯，具有软化血管和阻止血栓形成的作用，对心血管病患者十分有益。从药用价值出发，其全草可入药，有着开胃下气、利湿解毒的功效，可用于治疗食积不化、黄疸、消渴等病症。在观赏方面，诸葛菜花期长，花色素雅，是优良的观花耐阴地被，可片植、丛植于公园、庭园的林下绿地，也能应用于花坛、花境，还可盆栽观赏。此外，诸葛菜薹蛋白质、维生素、矿质元素含量较丰富，茎叶生物量大，具备一定饲用价值，种子还可用于榨油。

在不同的环境条件下，诸葛菜呈现出多种形态类型，植株形态上，有株型强壮或柔弱之分，分枝也存在较多或较少的差异；叶形更是多样，包括大头羽状或狭长型，叶边缘有或无缺刻；果实性状则有光滑和密生长柔毛两种类型。这种形态多样性反映了其基因组的变异以及适应不同生态环境的能力。研究诸葛菜不同形态类型的遗传多样性具有多方面的重要意义。在植物进化研究领域，能够深入了解诸葛菜的进化历程和演化机制，为揭示植物进化规律提供关键线索。对于育种工作而言，有助于挖掘优良基因资源，为培育具有优良性状的新品种奠定基础，比如通过对不同形态类型诸葛菜遗传多样性的分析，找到抗逆性强、品质优的基因，应用于新品种的培育。从生态研究层面出发，可以明晰诸葛菜对不同生态环境的适应策略，为生态保护和生态修复提供科学依据。

1.2国内外研究现状

目前，国内外针对诸葛菜的研究已取得了一定成果。在遗传多样性评估方面，分子标记技术得到了广泛应用。随机扩增多态性DNA分子标记（RAPD）曾被大量用于诸葛菜遗传多样性的评估。有研究通过RAPD分析发现，野生型诸葛菜的多态性高于栽培型诸葛菜，这表明遗传变异在其适应不同生态条件的过程中发挥着重要作用。相较于RAPD技术，序列-单核苷酸多态性捕捉（SSR）技术在评估诸葛菜遗传多样性时，具有更高的分辨率和更好的重复性。相关SSR分析显示，野生型诸葛菜比栽培型诸葛菜显著多样化，说明野生型诸葛菜的遗传多样性水平更高。此外，部分研究人员通过对基因序列的分析来探究诸葛菜不同形态类型之间的遗传多样性。例如，对粒细胞内质网（plastid）基因区域进行比较后发现，栽培型诸葛菜与野生型诸葛菜高度相似，但仍存在一定差异，这意味着栽培型诸葛菜的遗传多样性可能不及野生型诸葛菜。

然而，现有研究仍存在一些不足之处。虽然RAPD和SSR技术在评估诸葛菜遗传多样性中应用广泛，但它们在分辨率和重复性上仍有提升空间。目前，基于基因组数据的多态性研究还不够深入，难以全面、精准地揭示诸葛菜不同形态类型的遗传多样性及其内在机制。在形态特征与遗传多样性的关联研究方面，也有待进一步加强，尚未系统地解析形态差异背后的遗传基础。

基于此，本研究将聚焦于四种形态类型的诸葛菜，综合运用多种研究方法，深入剖析其遗传多样性，旨在填补现有研究的空白，为诸葛菜的深入研究和开发利用提供更为全面、准确的理论依据。

1.3研究内容与方法

本研究选取紫花-果实光滑、紫花-果实密生毛、白花-果实光滑、白花-果实密生毛这四种形态类型的诸葛菜作为实验材料。研究内容主要包括以下几个方面：首先，对四种形态类型诸葛菜的后代形态特征进行详细观察与统计，来年对种植后代的花色和果实被毛情况进行记录分析，探究其遗传稳定性和变异规律。其次，选择不同形态类型诸葛菜的单株为实验材料，在对cpDNA、matK及rbcL序列进行比较分析的基础上，采用邻接法（NJ）构建系统发育树，从而分析四种形态类型诸葛菜之间的亲缘关系。最后，采集来自南京中山植物园、玄武湖公园、南京清凉山公园、南京理工大学的不同形态类型诸葛菜共多个个体，运用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对这些个体的6种等位酶（苹果酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、乙醇脱氢酶、天冬氨酸转氨酶、淀粉酶、多酚氧化酶）的遗传多样性展开初步研究，通过对酶谱的观察和试验分析，揭