我国部分地区猪瘟E2及HeN2F16株基因特征剖析与防控启示.docxVIP

我国部分地区猪瘟E2及HeN2F16株基因特征剖析与防控启示

一、引言

1.1研究背景与意义

猪瘟（ClassicalSwineFever，CSF）作为养猪业的重要疫病，给我国养猪业带来了巨大的经济损失。猪瘟是由猪瘟病毒（ClassicalSwineFeverVirus，CSFV）引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，具有高发病率和高死亡率的特点。世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须报告的动物疫病，我国也将其列为一类动物疫病。

在我国，猪瘟的流行历史悠久，对养猪业的发展造成了严重的阻碍。尽管我国自1954年成功研制出猪瘟兔化弱毒疫苗（HCLV）并广泛应用，使得猪瘟的大规模暴发和流行得到了有效控制，免疫保护率一直在90%以上。但近年来，猪瘟在全国各地仍呈零星散发性流行，且临床表现日趋复杂，出现了非典型和温和型症状，给猪瘟的防控工作带来了极大的挑战。这不仅导致患病猪只生长发育受阻，料肉比大幅上升，养殖成本显著增加，还使得猪只死亡率居高不下，严重影响了养殖收益。在疫情严重地区，大量猪只因感染猪瘟被扑杀，直接导致猪肉市场供应短缺，价格波动，进而对整个养猪产业链产生冲击。据相关统计，全球每年因猪瘟造成的经济损失高达数亿美元。

猪瘟病毒的基因变异是导致其流行和防控困难的重要原因之一。E2基因是猪瘟病毒的主要免疫原性结构基因，其编码产生的E2蛋白是诱导机体产生中和抗体的重要蛋白，对机体的免疫应答产生重要影响，与病毒的传染性密切相关，在病毒的感染能力、诱导机体免疫应答、病毒定向传向和病毒逃避免疫应答等方面都起着关键作用。而HeN2F16株作为我国部分地区出现的猪瘟病毒株，对其进行基因测定与分析，有助于深入了解猪瘟病毒在我国的流行特点和变异规律，为猪瘟的防控提供科学依据。通过研究E2及HeN2F16株的基因特征，可以明确病毒的遗传演化关系，追溯病毒的起源和传播途径，从而为制定针对性的防控策略提供有力支持。准确掌握猪瘟病毒的基因变异情况，对于疫苗的研发和应用也具有重要意义，能够确保疫苗的有效性和针对性，提高猪瘟的防控效果。

1.2国内外研究现状

国内外学者对猪瘟病毒基因进行了广泛而深入的研究。在病原学研究方面，已明确猪瘟病毒属于黄病毒科瘟病毒属，是单股正链RNA病毒，其基因组全长约12.3kb，编码的多蛋白前体经切割形成至少12种成熟病毒蛋白。

在流行病学研究中，发现猪瘟病毒在全球分布广泛，非洲、欧洲和亚洲部分国家流行严重，传播途径涵盖直接接触感染猪只、间接接触感染物质以及通过蚊子、苍蝇等媒介传播。在诊断技术上，病原学检测如病毒分离（金标准但操作复杂耗时）、RT-PCR和实时荧光定量PCR（灵敏度高、特异性好、操作简便，为临床主要手段），血清学检测如ELISA、免疫荧光抗体技术等用于检测抗体。

在疫苗研究领域，目前市面上主要有弱毒疫苗、灭活疫苗和基因工程疫苗。弱毒疫苗免疫效果好、免疫期长，却有毒力返祖风险，如部分地区曾因弱毒疫苗毒力返祖引发小规模猪瘟疫情；灭活疫苗安全性高，但免疫效果弱，需多次接种；基因工程疫苗成为研究热点，具有免疫效果好、安全性高的优势。

对于猪瘟病毒E2基因的研究，国内外已有众多成果。研究表明，E2基因序列的变异率在3％-25％，是猪瘟病毒基因中变异较大的之一。E2基因编码的E2蛋白含有5个N-糖基化位点，由于糖基化的程度不同，分子量范围51-58kDa，蛋白的有无糖基化对猪瘟病毒的毒力和免疫原性有很重要的影响。E2蛋白含有4个抗原结构，A区、B区、C区和D区，是猪瘟病毒一种主要的抗原结构蛋白，存在于病毒粒子的表面，保守性相对较低，相对容易变异，能诱导机体产生中和抗体，抵御强毒猪瘟病毒的攻击。通过对E2基因特定区域核苷酸序列及编码氨基酸序列进行测定和变异分析，并构建遗传进化树，可追溯猪瘟病毒的起源。

然而，目前的研究仍存在一些不足与空白。虽然对猪瘟病毒E2基因的研究较多，但对于我国部分地区出现的特定毒株，如HeN2F16株的研究还相对较少，对其基因特征、变异规律以及与其他毒株的亲缘关系等方面的了解还不够深入。在基因测定和分析方法上，也需要不断优化和创新，以提高研究的准确性和效率。不同地区猪瘟病毒的流行特点和基因变异情况存在差异，需要进一步加强对各地区毒株的监测和研究，为猪瘟的精准防控提供更全面的依据。

1.3研究目标与内容

本研究旨在通过对我国部分地区猪瘟E2及HeN2F16株的基因测定与分析，揭示其基因特征和变异规律，为猪瘟的防控提供科学依据。具体研究内容如下：

基因序列测定：采集我国部分地区疑似感染猪瘟的猪只样本，提取病毒RNA，通过RT-PCR技术扩增E2基因及HeN2F16