CN116637236B 一种具有ros响应性聚多巴胺-柚皮素涂层的钛基材料及其制备方法和应用 （重庆大学）.docxVIP

(19)国家知识产权局

(12)发明专利

(10)授权公告号CN116637236B

(45)授权公告日2025.07.01

(21)申请号202310603137.5

(22)申请日2023.05.25

(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号CN116637236A

(43)申请公布日2023.08.25

(73)专利权人重庆大学

地址400044重庆市沙坪坝区沙坪坝正街

174号

(72)发明人胡燕陈茂华蔡开勇罗忠

(74)专利代理机构北京同恒源知识产权代理有限公司11275

专利代理师廖曦

(51)Int.CI.

A61L31/02(2006.01)

B05D7/14(2006.01)

B05D7/24(2006.01)

B05D7/00(2006.01)

A61L31/10(2006.01)

A61L31/08(2006.01)

A61L31/14(2006.01)

A61L31/16(2006.01)

(56)对比文件

CN115094056A,2022.09.23

WO2020244600A1,2020.12.10审查员张慧君

权利要求书2页说明书10页序列表(电子公布)附图7页

(54)发明名称

一种具有ROS响应性聚多巴胺/柚皮素涂层的钛基材料及其制备方法和应用

AH

AH?N-TK-NH?

CN116637236BBTK-DA本发明涉及一种具有ROS响应性聚多巴胺/柚皮素涂层的钛基材料及其制备方法和应用，属于功能化钛基材料的制备技术领域。本发明主要是在氨基化的钛片表面依次包覆络合Zn0的DNA纳米花(DNFzn)和ROS响应性的聚多巴胺/柚皮素涂层(PDA-Nar)。本发明表面具有ROS响应性聚多巴胺/柚皮素涂层的钛基材料(Ti/DNFzn/PDA-Nar)能够在骨质疏松的高ROS环境中驱动内皮细胞迁移，增加H型血管形成，通过H型内皮细胞和

CN116637236B

BTK-DA

CN116637236B权利要求书1/2页

2

1.一种具有ROS响应性聚多巴胺/柚皮素涂层的钛基材料，其特征在于，所述钛基材料从内到外依次包括氨基化的钛片、络合Zn0的DNF以及ROS响应性的聚多巴胺/柚皮素涂层；

所述络合ZnO的DNF是由DNA纳米花和氨基功能化的Zn0量子点通过静定吸附作用得到，其中DNA纳米花是SEQIDNO.1的碱基序列经过n次循环扩增后与x个SEQIDNO.3的核酸适配体络合形成，其中n、x均为大于等于1的整数。

2.根据权利要求1所述的钛基材料，其特征在于，所述DNA纳米花按照如下方法制备：将5端磷酸化的DNA模板、T4DNA连接酶和RCA扩增的引物置于10～30℃下反应过夜；然后在60～95℃下保持10～30min,使T4DNA连接酶失活，缓慢降温到10～30℃后加入三磷酸脱氧核苷和phi29DNA聚合酶，在10～30℃下反应6～12h后在80～95℃下加热10～20min使phi29DNA聚合酶失活，然后以8000～12000rpm的转速离心，用去离子水清洗沉淀两遍得到DNA纳米颗粒；最后将DNA纳米颗粒和具有内皮细胞靶向功能的核酸适配体分散在去离子水中，在55～65℃下加热10～30min后缓慢降至室温，得到DNA纳米花；

其中所述DNA模板是在碱基序列为SEQIDNO.1的5端连接磷酸基团，所述RCA扩增的引物的碱基序列如SEQIDNO.2所述，所述DNA纳米颗粒是SEQIDNO.1的碱基序列经过n次循环扩增后形成，其中n为大于等于1的整数，所述具有内皮细胞靶向功能的核酸适配体的核苷酸序列如SEQIDNO.3所述。

3.根据权利要求2所述的钛基材料，其特征在于，所述5端磷酸化的DNA模板、T4DNA连接酶、RCA扩增的引物、三磷酸脱氧核苷、phi29DNA聚合酶的比例为5～10:20～40:10～20:1～5:1～5,μM:U/μL:μM:mM:U/μL;

所述DNA纳米颗粒和具有内皮细胞靶向功能的核酸适配体的摩尔比为1:20～1:50。

4.根据权利要求1所述的钛基材料，其特征在于，所述氨基功能化的Zn0量子点按照如下方法制备：将二水合醋酸锌超声分散于甲醇中，边搅拌边滴加氢氧化钾的甲醇溶液，搅拌离心，收集沉淀，用甲醇溶液清洗颗粒两次即可得到Zn0量子点，继续将Zn0量子点分散在乙醇中，加入氨丙基三乙氧基硅烷溶液后进行回流反应，用乙醇清洗两次以