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林木原生质体融合杂种线粒体分离试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.原生质体融合常用的化学融合剂是（）

A.PEGB.DMSOC.TritonX-100D.SDS

2.分离线粒体时，常用的细胞破碎方法是（）

A.超声破碎B.研磨C.酶解D.冻融

3.杂种细胞筛选中，利用营养缺陷型标记筛选依据是（）

A.杂种细胞能在特殊培养基生长

B.亲本细胞能在特殊培养基生长

C.杂种细胞不能在特殊培养基生长

D.与培养基无关

4.线粒体DNA的形状通常是（）

A.线性B.环状C.分支状D.不规则

5.原生质体融合过程中，首先发生的是（）

A.核融合B.膜融合C.细胞器融合D.细胞壁再生

6.用于原生质体分离的酶液中，纤维素酶主要作用是（）

A.分解细胞膜B.分解细胞壁

C.分解细胞器膜D.分解核膜

7.筛选杂种细胞时，利用荧光标记筛选利用的是（）

A.荧光强度差异B.荧光颜色差异

C.有无荧光D.荧光分布

8.线粒体分离中，离心转速一般（）

A.较低B.较高C.固定值D.随意

9.原生质体融合后，鉴定杂种细胞最准确方法是（）

A.形态观察B.染色体分析

C.同工酶分析D.分子标记分析

10.杂种线粒体分离过程中，常用的密度梯度介质是（）

A.蔗糖B.氯化钠C.氯化铯D.葡萄糖

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.原生质体融合的方式有（）

A.化学融合B.物理融合C.生物融合D.自然融合

2.影响线粒体分离效果的因素有（）

A.细胞类型B.离心条件C.酶的种类D.缓冲液成分

3.杂种细胞筛选方法包括（）

A.形态筛选B.生理生化特性筛选

C.分子标记筛选D.随机筛选

4.用于原生质体分离的酶有（）

A.纤维素酶B.果胶酶C.淀粉酶D.蛋白酶

5.线粒体的功能包括（）

A.能量代谢B.合成蛋白质C.储存脂肪D.参与细胞凋亡

6.杂种线粒体遗传方式有（）

A.母系遗传B.父系遗传C.双亲遗传D.随机遗传

7.原生质体融合杂种鉴定技术有（）

A.细胞学鉴定B.生化鉴定C.分子鉴定D.功能鉴定

8.提高原生质体融合率的方法有（）

A.优化融合条件B.预处理亲本细胞

C.增加融合剂浓度D.延长融合时间

9.线粒体分离过程中，用到的仪器有（）

A.离心机B.显微镜C.移液器D.天平

10.杂种线粒体分离的意义在于（）

A.研究线粒体遗传B.培育优良品种

C.了解细胞代谢D.开发新的生物技术

三、判断题（每题2分，共10题）

1.原生质体融合后一定会形成杂种细胞。（）

2.线粒体在细胞中分布是均匀的。（）

3.化学融合剂PEG的浓度越高，融合效果一定越好。（）

4.杂种细胞的染色体数目一定是双亲染色体数之和。（）

5.利用密度梯度离心可有效分离线粒体。（）

6.原生质体没有细胞壁，所以更易进行基因操作。（）

7.线粒体DNA与核DNA遗传规律相同。（）

8.筛选杂种细胞时，只能用一种筛选方法。（）

9.酶解分离原生质体时，酶解时间越长越好。（）

10.杂种线粒体分离对林木遗传改良有重要意义。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述原生质体融合的基本步骤。

答：选取亲本材料，分离原生质体，将原生质体混合，采用化学或物理方法诱导融合，之后进行杂种细胞筛选、培养及鉴定。

2.说明线粒体分离的主要原理。

答：利用细胞各组分密度和沉降系数差异，通过差速离心或密度梯度离心，将线粒体与其他细胞器、细胞碎片等分开。

3.简述杂种细胞筛选的常用标记类型。

答：常用标记类型有营养缺陷型标记，利用亲本营养缺陷互补筛选；荧光标记，通过荧光特性筛选；还有抗性标记，基于对特定物质抗性筛选。

4.简要阐述原生质体融合杂种鉴定的必要性。

答：原生质体融合后可能出现多种情况，鉴定可确定杂种细胞真实性，明确其遗传组成和特性，为后续研究和利用提供依据，保障研究和育种准确性。

五、讨论题（每题5分，共4题）

1.讨论在林木原生质体融合杂种线粒体分离中，可能遇到的困难及解决策略。

答：困难有原生质体产量低、活力差，融合率不高，线粒体分离纯度低等。策略包