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2026年pcr培训结业考试试题

考试时长：120分钟满分：100分

试卷名称：2026年PCR培训结业考试试题

考核对象：PCR技术培训学员

题型分值分布：

-判断题（20分）

-单选题（20分）

-多选题（20分）

-案例分析（18分）

-论述题（22分）

总分：100分

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一、判断题（共10题，每题2分，总分20分）

1.PCR技术的基本原理是通过DNA聚合酶在体外复制特定的DNA片段。

2.引物在PCR反应中是特异性结合到模板DNA上的短链核苷酸序列。

3.PCR反应体系中必须加入Mg2?，但过高浓度的Mg2?会抑制PCR反应效率。

4.退火温度越高，PCR产物特异性越强，但可能导致引物二聚体增多。

5.PCR产物可以通过凝胶电泳进行分离和鉴定。

6.TaqDNA聚合酶是PCR反应的核心酶，其热稳定性使其能够在高温条件下工作。

7.PCR扩增过程中，变性温度通常高于引物退火温度。

8.巢式PCR可以提高PCR检测的灵敏度，但容易产生非特异性产物。

9.PCR反应体系中，dNTPs的浓度应均匀，过高或过低都会影响扩增效率。

10.实时荧光定量PCR（qPCR）可以实时监测PCR扩增过程，并定量目标基因表达水平。

二、单选题（共10题，每题2分，总分20分）

1.下列哪种酶最适合用于PCR反应？

A.DNA连接酶

B.DNA聚合酶

C.DNA限制性内切酶

D.RNA聚合酶

2.PCR反应中，引物二聚体形成的可能原因是？

A.引物浓度过高

B.退火温度过低

C.模板DNA浓度过低

D.Mg2?浓度过高

3.退火温度通常设定在？

A.低于DNA解链温度10℃～15℃

B.高于DNA解链温度10℃～15℃

C.等于DNA解链温度

D.与DNA解链温度无关

4.下列哪种方法可以用于提高PCR产物的特异性？

A.增加循环次数

B.降低退火温度

C.使用高浓度的Mg2?

D.优化引物设计

5.PCR反应体系中，哪个组分是PCR产物延伸的原料？

A.引物

B.DNA聚合酶

C.dNTPs

D.模板DNA

6.巢式PCR与普通PCR相比，主要优势是？

A.扩增效率更高

B.检测灵敏度更高

C.操作步骤更简单

D.产物特异性更强

7.实时荧光定量PCR中，常用的荧光报告基团是？

A.FAM

B.Cy5

C.TexasRed

D.FITC

8.PCR反应中，变性温度通常设定在？

A.50℃～65℃

B.65℃～75℃

C.75℃～85℃

D.85℃～95℃

9.下列哪种试剂可以用于PCR反应的终止？

A.EDTA

B.NaOH

C.HCl

D.无水乙醇

10.PCR产物的大小可以通过哪种方法进行鉴定？

A.毛细管电泳

B.液相色谱

C.凝胶电泳

D.质谱分析

三、多选题（共10题，每题2分，总分20分）

1.PCR反应体系中必须包含哪些组分？

A.模板DNA

B.引物

C.DNA聚合酶

D.dNTPs

E.Mg2?

2.影响PCR反应效率的因素包括？

A.引物设计

B.退火温度

C.循环次数

D.Mg2?浓度

E.模板DNA质量

3.下列哪些方法可以提高PCR检测的特异性？

A.优化引物设计

B.降低退火温度

C.使用高浓度的Mg2?

D.增加循环次数

E.使用巢式PCR

4.实时荧光定量PCR中，常用的荧光检测方法包括？

A.探针法

B.荧光染料法

C.荧光报告基团法

D.荧光酶法

E.荧光免疫法

5.PCR反应中，可能导致非特异性产物的因素包括？

A.引物设计不合理

B.退火温度过高