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基于蛋白组学的猪急性期蛋白表达特征及应激标志物筛选研究

一、引言

1.1研究背景与意义

在现代化的猪养殖产业中，猪群面临着各种各样的应激因素，这些应激对猪的健康、生长性能以及肉品质量均产生了不可忽视的影响，给养猪业带来了显著的经济损失。应激是猪体对内外环境刺激所产生的非特异性应答反应，常见的应激源涵盖了饲养管理、环境、致病微生物、遗传以及人为因素等多个方面。例如在饲养管理方面，密饲、捕捉、转群与运输、争斗、营养不良、免疫接种、去势、打耳标、断尾等操作，都可能使猪产生应激反应。从环境角度来看，酷暑、严寒、强辐射、低气压、有毒有害气体、尘埃、湿气、强风与贼风、噪声等不良环境条件，也会对猪的生理状态造成干扰。在致病微生物方面，猪群生活环境中的细菌、病毒、寄生虫、支原体及衣原体等，一旦感染猪体，同样会引发应激。遗传因素也起着关键作用，如隐性氟烷基因纯合体猪就更容易产生应激反应。此外，养猪设备的不适宜、生产性能的过度利用等人为因素，也可能导致生猪出现应激。

猪应激常常引发急性死亡以及愈后不良等严重后果。在急性死亡方面，猪受到有害因素刺激时，会出现机能障碍或防御反应，最初表现为呼吸困难，体温快速升高，皮肤红白交替，黏膜发绀，肌肉或尾巴震颤；后期则会肌肉僵硬，体温过高，眼球突出，难以站立，甚至呈现休克状态，最严重时会毫无症状暴毙。而在愈后不良方面，即便猪在应激后没有立即死亡，但受到应激造成伤害程度的影响，有些机体会出现生长问题，或者频繁发病，生长严重受限。

猪应激还会对肉品质量产生负面影响，随着消费者对食品安全和肉品质量要求的不断提高，应激导致的肉质下降问题愈发受到关注。PSE肉（即苍白、柔软、渗水肉）的产生就与猪应激密切相关，这种肉色泽苍白、质地柔软、保水性差，严重影响了肉品的外观和口感，降低了其市场价值。

急性期蛋白（APP）作为一项能灵敏反映动物健康状态及潜在病变的指标，在猪应激研究中具有重要价值。当猪体受到感染、创伤、炎症等应激原刺激时，急性期蛋白的浓度会发生显著变化。例如，血清淀粉样蛋白（SAA）、结合珠蛋白（HP）、C-反应蛋白（CRP）和α1-酸性糖蛋白等，都是常见的急性期蛋白。在猪受到应激时，这些急性期蛋白的含量会迅速上升，通过检测它们的浓度变化，能够及时准确地判断猪是否处于应激状态，以及应激的程度。这为养猪业提供了一种有效的监测手段，有助于提前采取措施，减少应激对猪群的危害。

寻找可靠的应激标志物对于养猪业实现精准养殖和高效管理至关重要。传统的应激监测方法往往存在一定的局限性，如通过观察猪的行为表现来判断应激，这种方法主观性较强，容易受到观察者经验和判断标准的影响，而且在应激初期，猪的行为变化可能并不明显，难以做到及时发现。而血液生化指标的检测虽然能在一定程度上反映猪的健康状况，但缺乏特异性，很多指标的变化可能是由多种因素引起的，不能准确地指向应激。因此，筛选出特异性强、灵敏度高的应激标志物迫在眉睫。通过对猪急性期蛋白表达的深入分析，以及利用先进的蛋白组学技术筛选应激相关标志物，能够为养猪业提供更为精准、有效的应激监测方法。这不仅有助于及时发现猪群中的应激个体，采取针对性的干预措施，降低应激带来的损失，还能为猪的健康养殖提供科学依据，促进养猪业的可持续发展。

1.2国内外研究现状

国外在猪急性期蛋白和应激标志物的研究方面起步较早，取得了一系列具有重要价值的成果。在急性期蛋白研究领域，对多种急性期蛋白的生物学功能、合成调控机制以及在疾病诊断和健康评价中的应用进行了深入探索。研究明确了血清淀粉样蛋白（SAA）、结合珠蛋白（HP）、C-反应蛋白（CRP）等在猪应激反应中的重要作用，发现它们在猪受到感染、炎症等应激刺激时，浓度会迅速且显著地升高，并且对这些蛋白的变化规律和作用机制有了较为清晰的认识。在应激标志物筛选方面，运用蛋白质组学、代谢组学等先进技术，全面系统地分析猪在不同应激条件下的分子变化，成功筛选出了一些与应激密切相关的潜在标志物。有研究通过对运输应激猪的血液和组织样本进行蛋白质组学分析，发现了多个差异表达的蛋白，这些蛋白在能量代谢、免疫调节等生理过程中发挥关键作用，为进一步理解应激机制和开发应激监测指标提供了有力支持。

国内在该领域的研究虽然起步相对较晚，但近年来发展迅速，也取得了不少令人瞩目的成果。在急性期蛋白方面，针对我国不同品种猪的急性期蛋白表达特征展开了广泛研究，分析了品种、饲养环境、疾病等因素对急性期蛋白表达的影响，为建立适合我国国情的猪健康评价体系奠定了基础。在应激标志物筛选上，结合国内养猪业的实际情况，利用现代生物技术，从不同角度挖掘潜在的应激标志物。有研究通过对免疫应激和运输应激仔猪的肝脏组织和血清进行检测，筛选出载脂蛋白A1（Apo-A1）和猪主要急性期蛋白（Pig-MA