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冷冻电镜技术试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.冷冻电镜技术中，样品快速冷冻的主要目的是什么？

A.防止样品在电子束照射下发生辐射损伤

B.使样品脱水并形成玻璃态状态

C.提高样品的导电性

D.增强样品的散射能力

2.以下哪种样品制备方法适用于观察生物大分子复合物？

A.透射电镜（TEM）负染技术

B.化学固定和戊二醛交联

C.旋转蒸发

D.重金属染色

3.在冷冻电镜图像数据处理中，autopick程序的主要功能是？

A.对原始图像进行傅里叶变换

B.自动识别和提取颗粒

C.进行多视角的平均

D.计算最终模型的分辨率

4.以下哪个参数是评估冷冻电镜图像质量的重要指标？

A.图像分辨率（?）

B.图像尺寸（μm）

C.图像对比度

D.样品温度（K）

5.冷冻电镜重构中，classaveraging指的是？

A.对所有颗粒图像进行二维傅里叶变换

B.对具有相似投影方向的颗粒图像进行平均

C.对重构的密度图进行平滑处理

D.将不同视角的密度图合并

6.以下哪种方法通常用于提高冷冻电镜重构的分辨率？

A.增加样品浓度

B.使用更短的电子束波长

C.降低放大倍数

D.使用更厚的样品载网

7.在冷冻电镜中，low-dose成像指的是？

A.使用较低的电压进行成像

B.使用较少的电子束剂量照射样品

C.使用较低的温度进行成像

D.使用较短的曝光时间

8.以下哪个软件常用于冷冻电镜图像的自动识别和分类？

A.Coot

B.Chimera

C.Relion

D.PyMOL

9.冷冻电镜技术能够直接解析出生物分子的？

A.核酸序列

B.氨基酸序列

C.三维结构

D.功能特性

10.与传统透射电镜相比，冷冻电镜的主要优势在于？

A.更高的分辨率

B.更高的通量

C.无需样品染色

D.更低的制样要求

二、填空题（每空1分，共10分）

1.冷冻电镜样品通常需要在_______的条件下进行加载。

2.电子束与样品相互作用产生的主要物理效应是_______和_______。

3.冷冻电镜数据处理中，beamdeflection技术用于_______。

4.分辨率通常用_______来衡量，单位是埃（?）。

5.如果一个冷冻电镜样品制备不当，可能会导致图像出现_______现象。

6.particlepicking是冷冻电镜数据处理中的第一步，目的是_______。

7.在冷冻电镜重构中，modelbuilding指的是_______。

8.评估冷冻电镜重构质量常用的指标有_______和_______。

9.冷冻电镜技术能够解析生物大分子的_______结构。

10.同源建模是指利用已知结构的_______来解析未知结构。

三、名词解释（每题3分，共15分）

1.Cryo-EM

2.FourierTransform

3.ContrastTransferFunction(CTF)

4.Resolution

5.Modelbuilding

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述冷冻电镜样品制备的基本步骤。

2.解释什么是“低剂量”成像，为什么在冷冻电镜中需要采用低剂量？

3.简述冷冻电镜数据处理中“classaveraging”的基本原理。

4.比较冷冻电镜与X射线晶体学在解析生物分子结构方面的主要异同点。

五、论述题（10分）

结合冷冻电镜技术的原理和数据处理流程，论述其作为一种结构生物学研究工具的优势和局限性。

试卷答案

一、选择题

1.B

2.B

3.B

4.A

5.B

6.B

7.B

8.C

9.C

10.C

二、填空题

1.低真空

2.辐射损伤，二次电子发射

3.调节图像对比度

4.相位

5.模糊

6.提取有价值的颗粒图像

7.在电子密度图上构建生物分子模型

8.加权分辨率，R因子

9.三维

10.结构同源体

三、名词解释

1.Cryo-EM:冷冻电子显微镜技术，通过快速冷冻样品以玻璃态