原创力文档- 1、本文档内容版权归属内容提供方，所产生的收益全部归内容提供方所有。如果您对本文有版权争议，可选择认领，认领后既往收益都归您。。
- 2、本文档由用户上传，本站不保证质量和数量令人满意，可能有诸多瑕疵，付费之前，请仔细先通过免费阅读内容等途径辨别内容交易风险。如存在严重挂羊头卖狗肉之情形，可联系本站下载客服投诉处理。
- 3、文档侵权举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
摘要
[目的]构建大刺鳅抗冻蛋白AFP-2的原核表达载体并对重组蛋白进行纯化及体外抗寒活性进行初
步探讨。[方法]设计原核表达引物，分别在N端、C端引入NcoI和BamHI酶切位点，从实验室保
存的菌液pMD18T-AFP-2中扩增不含信号肽的AFP-2片段，双酶切并与相同酶切后的pTWIN1连接，转
化到TOP10中，阳性克隆经测序鉴定正确后，提取质粒转化到表达菌株DE3中。诱导表达重组蛋白，
纯化后对其抗寒活性进行分析。[结果]成功构建了pTWIN1-AFP-2原核表达载体,获得纯化AFP-2蛋
白，并发现其抗寒活性
文档评论（0）