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《生化分离工程》思考题及答案试卷及答案

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思考题

1.简述影响过滤过程传质效率的几个关键因素，并说明如何通过操作条件的调整来提高过滤效率。

2.比较板式塔和填料塔在蒸馏分离中的应用特点，分析各自适用于哪些类型的物系和分离要求。

3.吸附分离是一种重要的生化分离技术，请阐述其基本原理，并说明选择吸附剂和确定吸附条件（如温度、压力、流速）时需要考虑的主要因素。

4.膜分离技术在生化分离中具有独特优势，请简述反渗透、超滤、纳滤这三种压力驱动膜分离技术的核心原理，并指出它们在分离性能（如截留分子量范围）上的主要区别。

5.在色谱分离中，范德华力、静电力、氢键力等相互作用可能同时存在并影响分离选择性。请选择一种特定的色谱类型（如离子交换色谱、凝胶过滤色谱、疏水相互作用色谱），说明其主要的分离机制，并解释如何通过改变洗脱条件来控制分离效果。

6.假设你需要从含目标蛋白的粗提液中去除核酸和多糖杂质，请简述可能会采用的一种或多种层析分离方法，并说明选择这些方法的依据。

7.在设计一个生化产品的分离纯化过程时，除了考虑目标产物的性质和杂质的特点外，还需要考虑哪些工程因素？请列举至少三个方面并简要说明。

8.什么是萃取？简述液-液萃取过程的基本原理。对于一种特定的生化物质，如果其在水相和有机相中的分配系数很小，你会如何优化萃取过程以提高其回收率？

9.综合运用你所学的知识，简要描述如果你需要分离和纯化一种分子量较小（如几千道尔顿）、等电点在中性附近的水溶性蛋白质，你会考虑采用哪些分离单元操作或技术，并说明选择它们的逻辑。

试卷答案

1.解析思路：首先列出影响过滤传质效率的关键因素，如滤饼厚度、孔道堵塞、浓度极化层厚度、操作压力、滤饼特性（压缩性、可压缩性）、流体粘度等。然后，针对每个因素，提出提高效率的操作调整方法，例如：减少滤饼厚度（降低过滤速度、采用预涂层）；缓解孔道堵塞（选择合适的滤布、定期清洗）；减薄浓度极化层（提高流速、降低操作温度、添加添加剂、采用错流过滤）；提高操作压力（在合理范围内）；选择合适的滤饼特性（如不可压缩滤饼）；降低流体粘度（加热）。

2.解析思路：先对比板式塔和填料塔的结构特点（有固定塔板vs填料填充塔体）。然后，根据特点分析其适用性：板式塔优点是塔板效率高、不易堵塞、操作弹性大，适用于处理易起泡、易堵塞、腐蚀性或高粘度物料，以及需要精确控制液相流量的情况；缺点是压降较大。填料塔优点是压降小、塔径相对较小、适用于处理热敏性物料和真空蒸馏，易于实现连续操作；缺点是塔板效率相对较低、易堵塞、操作弹性小。根据物系特性（如粘度、是否易起泡、是否热敏）和分离要求（如分离精度、处理量、压降限制）选择合适的塔型。

3.解析思路：阐述吸附原理：吸附剂表面与被吸附物质分子间存在相互吸引力（如范德华力、氢键、离子键等），导致后者从流体相转移到吸附剂表面并停留。选择吸附剂需考虑：吸附剂与被吸附物的相互作用力强弱、选择性（对目标物吸附能力远高于杂质）、吸附容量、稳定性（化学和热稳定性）、机械强度、孔结构（孔径、比表面积）、成本。确定吸附条件需考虑：温度（通常吸附放热，低温有利于吸附；但需考虑吸附剂和产物的热稳定性）、压力（对气体和挥发性液体，压力升高有利于吸附）、流速（影响接触时间和传质效率，需在保证有效接触的前提下选择）、溶剂性质（影响被吸附物溶解度和吸附选择性）。

4.解析思路：分别简述三种膜分离原理：反渗透（RO）利用高压使水分子通过半透膜，而溶解的溶质（盐分等）被截留，主要基于溶解-扩散或孔流模型。超滤（UF）利用压力驱动，根据膜孔径（通常0.01-0.1微米）截留相对较大的分子（如蛋白质、多糖、病毒）和胶体，溶质和水分子的分离主要依赖大小筛分。纳滤（NF）介于反渗透和超滤之间，膜孔径更小（几纳米），能截留二价及多价离子、小分子量有机物，对一价离子的截留率较低，分离机制包含筛分和静电作用。主要区别在于膜孔径大小和截留分子/离子的范围，反渗透最细，纳滤居中，超滤最粗。

5.解析思路：选择一种色谱类型，例如离子交换色谱（IEX）：其基本原理是利用固定相（离子交换树脂）上的可解离基团与流动相（缓冲液）中的离子发生交换，当带相反电荷的蛋白质流过时被吸附，通过改变洗脱条件（如pH、离子强度）来竞争性置换蛋白质上的离子，实现分离。分离选择性取决于蛋白质与固定相、流动相离子间的相互作用强度。改变洗脱条件，如提高盐浓度（竞争性置换）或改变pH（改变蛋白质电荷状态）可减弱或消除吸附，从而洗脱不同蛋白质。

6.解析思路：描述分离策略时，需结合目标蛋白和杂质的性质。例如，核酸通常分子量较大，带电荷，可考