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高通量筛选试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、简答题（每题6分，共30分）

1.简述高通量筛选（HTS）的基本原理及其主要优势。

2.列举至少三种高通量筛选中常用的检测模式，并简要说明其原理。

3.在高通量筛选的数据处理与分析中，什么是归一化？其目的是什么？

4.高通量筛选平台通常需要具备哪些关键性能指标？

5.简述高通量筛选在药物研发和农业育种中的主要应用区别。

二、填空题（每空2分，共20分）

1.高通量筛选的核心在于实现________、________和________。

2.常用的高通量筛选自动化仪器包括________、________和________等设备。

3.数据探针（Data探针）主要用于高通量筛选数据的________和________。

4.信号检测方法在高通量筛选中至关重要，常见的物理检测信号包括________、________和荧光信号等。

5.高通量筛选实验设计应遵循________原则，以确保结果的可靠性和可重复性。

三、计算题（10分）

假设某项高通量筛选实验使用384孔微板进行，每孔接种的细胞数量为1x10^3个。筛选过程中，阳性反应孔（药物有效）的信号强度平均值为5000，标准差为300。阴性对照孔（药物无效）的信号强度平均值为1000，标准差为100。请计算该筛选实验的Z-score阈值，并解释Z-score在此处的作用。（提示：可参考Z-score计算公式，假设阴性对照信号呈正态分布）

四、论述题（每题10分，共20分）

1.比较并论述高通量筛选与传统的单靶点、低通量筛选方法在药物发现过程中的主要异同点。

2.讨论高通量筛选在现代社会面临的挑战（如成本、假阳性/假阴性率、数据解读复杂性等）以及可能的未来发展趋势。

试卷答案

一、简答题（每题6分，共30分）

1.答案：高通量筛选（HTS）的基本原理是通过自动化、高效率的技术平台，快速、并行地对大量化合物（或生物分子、基因等）进行筛选，以发现具有特定生物活性的先导化合物（或功能基因等）。其主要优势包括：高通量（单位时间内可测试的化合物数量巨大）、高效率（节省时间和人力成本）、系统性（可覆盖广泛的化合物或分子库）、数据驱动（依赖大量数据进行决策）。解析思路：此题考查HTS的核心概念和优点。原理部分需说明其快速、并行测试大量样本的特点；优势部分需列举效率、成本、系统性、数据驱动等方面的好处。

2.答案：常用的高通量筛选检测模式包括：1）比色法：通过检测化学反应产生或消耗的色素来衡量反应活性，如酶促反应产物的颜色变化；2）荧光法：利用荧光物质的发光或淬灭变化来检测分子相互作用、信号通路等，如荧光酶报告基因系统；3）放射性同位素法：通过检测放射性同位素衰变产生的信号来监测生物过程，如放射性受体结合实验；4）电化学法：通过检测电极上发生的电流或电位变化来分析目标分子活性。解析思路：此题要求列举并简要说明检测模式。需掌握常见的几种模式（比色、荧光、放射性、电化学）及其基本检测原理。

3.答案：归一化是指在高通量筛选数据处理中，将原始检测信号（如荧光强度、吸光度等）根据特定的参照（如细胞数量、蛋白浓度、时间、对照品信号等）进行调整，以消除不同实验孔、不同板间、不同实验批次间的系统误差，从而更准确地反映样品间的相对活性差异。其目的是使数据具有可比性，便于后续的分析、比较和统计判断。解析思路：此题考查归一化的定义和目的。定义需说明是调整原始信号及参照物；目的需说明消除误差、保证数据可比性的作用。

4.答案：高通量筛选平台的关键性能指标通常包括：1）高通量能力：单位时间内能处理的样本数量（如每分钟处理的孔数或板数）；2）精确性与重现性：保证操作和检测结果的准确度和一致性；3）灵敏度与动态范围：能够检测到微弱信号并能准确区分不同强度的信号；4）自动化程度：自动化操作的水平和范围，减少人为干预；5）数据处理能力：配套软件的效率和功能，能否快速、准确地处理和分析海量数据；6）通量与容量匹配：仪器处理能力与所需测试样本量之间的匹配度。解析思路：此题要求列举关键性能指标。需围绕通量、精度、灵敏度、自动化、数据处理、匹配度等方面进行回答。

5.答案：高通量筛选在药物研发中主要应用于快速筛选大量化合物库，发现具有特定生物活性的先导化合物，用于后续的药物优化；在农业育种中主要应用于大规模筛选抗病性、抗逆性、产量相关性状等优良基因或突变体，加速育种进程。主要区别在于药物研发侧重于发现新的生物活性分子，而农业育种侧重于筛选改良作物性状的基因或个体。解析思路：此题要求比较药物研发和农业育种的应用区别。需分别说明两者在HT