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基于AFLP及SCAR分子标记解析苦瓜性别分化的遗传密码

一、引言

1.1研究背景与意义

苦瓜（MomordicacharantiaL.）作为葫芦科苦瓜属一年生植物，在蔬菜种植领域占据重要地位。其果实不仅是餐桌上常见的食材，还具有显著的药用价值，富含苦瓜素和苦瓜甙，具备降血糖、抗癌、抑菌和消炎等功效，深受消费者青睐，在全球热带、亚热带和温带地区广泛种植。

苦瓜为雌雄同株异花植物，性别分化对其产量和品质起着关键作用。在自然条件下，苦瓜雄花通常先于雌花出现，且数量较多，而生产中为实现早熟高产，期望苦瓜早生、多生雌花。因为雌花数量直接关联果实数量，雌花发育良好与否影响果实大小、形状及口感等品质指标，所以深入了解苦瓜性别分化机制，对提高苦瓜产量和品质意义重大。

传统育种主要依赖形态特征和表现型进行选择，周期长、效率低，且受环境因素影响大。随着分子生物学技术迅猛发展，DNA分子标记技术应运而生。AFLP（扩增片段长度多态性）及SCAR（序列特异性扩增区）分子标记技术在植物遗传研究中展现出独特优势。AFLP技术结合了RFLP和PCR技术的优点，具有多态性丰富、灵敏度高、稳定性好等特点，无需预先知道DNA序列信息，可在全基因组范围内检测多态性位点，已广泛应用于植物遗传图谱构建、基因定位、遗传多样性分析等领域。SCAR标记则是在RAPD标记基础上发展而来，通过对特定RAPD片段进行克隆、测序，设计出较长的特异性引物，将RAPD标记转化为特异、稳定的SCAR标记，重复性和稳定性更好，操作相对简便，在植物品种鉴定、分子标记辅助选择育种等方面发挥重要作用。

将AFLP及SCAR分子标记技术应用于苦瓜性别分化研究，有助于从分子水平揭示苦瓜性别分化的遗传机制，找到与性别分化相关的分子标记。这些标记可作为早期鉴定苦瓜性别的有效工具，在苦瓜育种过程中，利用分子标记辅助选择技术，能在苗期准确筛选出具有目标性别的植株，大大缩短育种周期，提高育种效率，加速优良品种选育进程，为苦瓜产业发展提供有力的技术支持。

1.2国内外研究现状

在苦瓜性别分化研究领域，国内外学者已取得一定成果。国内方面，陈瑶瑶等人从苦瓜在自然条件下性别的表现特点、性别分化的形态学、遗传基础、性别分化调控等方面进行了综述，指出苦瓜是雌雄同株的一年生蔓生性草本植物，性喜高温，开花结果期长，通常可达3-4个月，性别表现类型多样，雌雄花一般叶腋单生，雌花极少数叶腋丛生，分枝性较强，主蔓、子蔓及孙蔓上均有雌、雄花形成。汪俏梅和曾广文研究了赤霉酸及矮壮素对苦瓜性别表现的影响，发现赤霉酸促进雄花分化，矮壮素促进雌花分化。王日升等对纯雌系苦瓜花经AgNO?诱雄后的雄蕊发育和基因表达进行研究，为苦瓜性别调控提供了理论依据。

国外学者也对苦瓜性别分化开展了相关研究。部分研究关注环境因素对苦瓜性别分化的影响，如温度、光照等。研究发现，适宜的温度和光照条件有利于雌花的形成，高温短日照条件下，苦瓜雄花数量增多，而低温长日照则有利于雌花发育。但目前关于环境因素影响苦瓜性别分化的分子机制尚未完全明确。

在AFLP及SCAR分子标记技术应用于植物性别研究方面，国外起步相对较早。AFLP技术最早由荷兰科学家Zabeau和Vos于1993年发明，随后在植物遗传研究中得到广泛应用。一些国外研究利用AFLP技术构建了多种植物的遗传图谱，并对性别相关基因进行定位。SCAR标记技术在植物性别鉴定中也有应用，通过将与性别相关的RAPD标记转化为SCAR标记，提高了性别鉴定的准确性和稳定性。

国内在AFLP及SCAR分子标记技术应用于植物性别研究方面发展迅速。李刚等选用苦瓜品种为全雌性苦瓜和强雄性泰国苦瓜为双亲杂交获得F?，F?与全雌性苦瓜回交，以回交获得的BC?为实验材料，采用AFLP技术，获得了一条与苦瓜性别连锁的标记，并把该标记成功转化为SCAR标记，为苦瓜性别早期鉴定提供了有效工具。

尽管国内外在苦瓜性别分化以及AFLP、SCAR分子标记技术在植物性别研究中的应用取得了一定进展，但仍存在不足与空白。现有研究对苦瓜性别分化的分子机制研究不够深入，许多调控性别分化的关键基因和信号通路尚未明确。在分子标记技术应用方面，虽然已获得一些与苦瓜性别相关的分子标记，但标记的数量和准确性有待进一步提高，且如何将这些标记更好地应用于苦瓜育种实践，实现高效、精准的分子标记辅助选择育种，还需要进一步探索和研究。

1.3研究目标与内容

本研究旨在深入探究苦瓜性别分化的遗传机制，利用AFLP及SCAR分子标记技术，筛选出与苦瓜性别紧密连锁的分子标记，并将其转化为稳定、可靠的SCAR标记，为苦瓜性别早期鉴定及分子标