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生物滴滤塔去除NOx过程中微生物种群结构研究

一、引言

NOx作为一类极具危害的空气污染物，其引发的环境问题不容小觑。它不仅是形成雾霾的关键因素，促使空气中颗粒物浓度增加，降低大气能见度，影响交通和人体呼吸系统；还是导致酸雨的重要前驱体，NOx在大气中经过一系列复杂的氧化反应生成硝酸等酸性物质，随降水落到地面，对土壤、水体和植被造成严重损害；同时，NOx也是加剧温室效应的因素之一，对全球气候变暖产生推动作用。

生物滴滤塔作为一种行之有效的生物处理技术，在NOx去除领域展现出独特优势。它借助微生物的代谢活动，将NOx转化为无害或危害较小的物质。微生物在生物滴滤塔中扮演着核心角色，其种群结构的组成和变化对生物滴滤塔的性能有着决定性影响。不同的微生物具有不同的代谢途径和功能，它们之间相互协作或竞争，共同构建了一个复杂的微生态系统。因此，深入研究生物滴滤塔去除NOx过程中微生物种群结构的变化规律，对于进一步提升生物滴滤塔的性能、优化其运行参数以及推动该技术的广泛应用具有至关重要的意义。

二、实验设计

2.1实验装置

本研究采用自制的生物滴滤塔作为核心实验装置。生物滴滤塔主体通常由耐腐蚀的材料制成，如有机玻璃，以确保在实验过程中不会因化学腐蚀而影响实验结果。其结构设计需充分考虑气体和液体的流动特性，以实现高效的传质和反应效果。塔内填充有特定的滤料，滤料作为微生物附着生长的载体，其特性对微生物群落的形成和发展起着关键作用。本实验选用了多种滤料进行对比研究，包括传统的陶粒滤料和具有特殊孔隙结构的新型合成滤料等。这些滤料在比表面积、孔隙率、表面电荷等物理化学性质上存在差异，为微生物提供了不同的栖息环境。

2.2滤料处理方式

为了探究不同处理方式对微生物群落的影响，对滤料进行了多样化的预处理。

UV辐射处理：利用紫外线的杀菌和诱变作用，对滤料表面的微生物进行一定程度的筛选和刺激。将滤料置于特定波长和强度的紫外线照射下，控制照射时间，使部分对紫外线敏感的微生物被灭活，同时可能诱导存活微生物发生基因突变，从而促进微生物群落结构的改变，增加其多样性。

化学清洗处理：采用合适的化学试剂对滤料进行清洗，以去除滤料表面可能存在的杂质、有机物和部分微生物。例如，使用稀盐酸溶液去除滤料表面的金属氧化物等无机杂质，再用去离子水反复冲洗至中性。这种处理方式可以改变滤料表面的化学性质，为新的微生物附着创造条件，进而影响微生物群落的结构。

高温消毒处理：将滤料置于高温环境下进行消毒，一般在高温灭菌锅中以121℃左右的温度处理一定时间。高温能够杀灭滤料表面和内部孔隙中的绝大多数微生物，使滤料处于近乎无菌的状态。之后在后续的实验过程中，微生物将重新在滤料上定殖和生长，形成新的微生物群落结构。

2.3微生物群落分析技术

本研究运用PCR-DGGE（聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳）技术来深入分析微生物群落的结构。该技术的原理基于不同微生物的16SrDNA（核糖体DNA）序列存在差异，通过PCR扩增微生物的16SrDNA片段，然后将扩增产物在含有变性剂梯度的聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳分离。由于不同序列的DNA片段在变性剂梯度凝胶中的解链行为不同，从而在凝胶上呈现出不同的条带位置，每个条带代表一种或几种具有相似16SrDNA序列的微生物类群。通过对凝胶上条带的分析，可以直观地了解微生物群落的组成和多样性变化情况。同时，结合生物信息学分析方法，如与已知微生物序列数据库进行比对，可以进一步鉴定出微生物群落中的主要菌种。

在实验过程中，首先从生物滴滤塔不同位置的滤料表面采集微生物样品。采样时需确保样品的代表性，尽量采集足够量的生物膜以保证获得丰富的微生物信息。然后提取微生物样品中的总DNA，这一步骤需要采用高效、可靠的DNA提取试剂盒，以保证提取的DNA质量和完整性。接着以提取的总DNA为模板，利用特异性引物进行PCR扩增16SrDNA片段。扩增条件需经过优化，以确保扩增的特异性和效率。最后将扩增产物进行DGGE电泳分析，通过凝胶成像系统获取电泳图谱，并运用专业的图像分析软件对图谱中的条带进行分析，计算微生物群落的多样性指数，如香农-威纳指数（Shannon-Wienerindex）和辛普森指数（Simpsonindex）等，以定量评估微生物群落的多样性程度。同时，对特征条带进行切胶回收、克隆测序，将测序结果与GenBank等数据库进行比对，确定微生物的种类和分类地位，从而全面深入地了解生物滴滤塔内微生物种群结构的组成和变化。

三、结果与讨论

3.1微生物群落结构的时间变化

随着实验时间的推移，生物滴滤塔内微生物群落结构呈现出显著的动态变化。在实验初期，未经处理的滤料上微生