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研究报告

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等温多自配引发扩增技术快速检测学校餐饮中三种食源性致病菌

一、研究背景与意义

1.食源性致病菌的危害

(1)食源性致病菌是一类广泛存在于食物中的微生物，包括细菌、病毒、寄生虫等，它们可以引起人类食物中毒，严重危害人类健康。据统计，每年全球约有5亿人受到食源性疾病的威胁，其中约42万人死亡。其中，细菌性食源性疾病最为常见，占食源性疾病的70%以上。沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等细菌性食源性疾病是导致食源性疾病的主要病原体。

(2)食源性致病菌的危害不仅体现在健康损害上，还可能对社会经济造成严重影响。以沙门氏菌为例，2015年美国发生的一起沙门氏菌感染事件，导致超过900人感染，其中多人住院治疗，直接经济损失高达1.2亿美元。此外，食源性致病菌还可导致慢性疾病，如慢性腹泻、肠炎等，长期影响患者的身心健康。据世界卫生组织（WHO）统计，食源性致病菌导致的慢性腹泻每年在全球范围内导致约1000万人死亡。

(3)食源性致病菌的传播途径多样，包括食物、水、土壤、动物等。在学校餐饮中，由于学生群体集中、免疫力相对较低，食源性致病菌的危害尤为严重。例如，2018年中国某学校发生的集体食物中毒事件，导致数百名学生出现腹泻、呕吐等症状，经调查确认是由金黄色葡萄球菌引起的。这类事件不仅给学生身心健康带来严重影响，也给学校管理和社会稳定带来压力。因此，加强食源性致病菌的防控，对于保障公众健康、维护社会稳定具有重要意义。

2.学校餐饮卫生现状

(1)学校餐饮作为学生日常饮食的主要来源，其卫生状况直接关系到学生的身体健康。然而，当前我国学校餐饮卫生现状不容乐观。部分学校食堂存在设施设备陈旧、卫生条件差的问题，如厨房通风不良、餐具清洗消毒不彻底等，这些都可能导致食源性疾病的传播。

(2)此外，学校餐饮从业人员素质参差不齐，部分食堂工作人员缺乏食品安全意识和专业知识，未能严格遵守操作规程，如食品原料采购无严格把关、加工过程不规范等，增加了食源性疾病的风险。同时，学校餐饮管理也存在一定问题，如食品安全监管不到位、应急预案不完善等，使得一旦发生食源性疾病事件，难以迅速有效应对。

(3)随着食品安全问题的日益凸显，近年来我国政府和相关部门加大了对学校餐饮卫生的监管力度。虽然取得了一定成效，但学校餐饮卫生现状仍需持续关注和改进。一方面，需加强学校食堂设施设备的更新改造，提高卫生条件；另一方面，要加强对餐饮从业人员的培训和管理，提高其食品安全意识。此外，还需建立健全食品安全监管体系，确保学校餐饮卫生安全。

3.等温多自配引发扩增技术的优势

(1)等温多自配引发扩增技术（isothermalamplification）是一种新兴的分子生物学技术，与传统的聚合酶链反应（PCR）相比，具有显著的优势。该技术能够在没有热循环设备的情况下进行DNA扩增，极大地简化了实验操作流程。例如，在2017年的一项研究中，研究人员使用等温多自配引发扩增技术对饮用水中的霍乱弧菌进行了检测，结果表明该技术在15分钟内即可完成扩增，而传统PCR则需要至少30分钟，且需要专业的实验室设备。

(2)等温多自配引发扩增技术在成本效益方面也具有显著优势。由于其操作简单，无需复杂的仪器设备和大量的试剂消耗，因此能够大幅度降低实验成本。据估算，等温多自配引发扩增技术的成本仅为传统PCR的1/10左右。这种成本优势在发展中国家尤其重要，有助于提高这些地区食源性疾病的检测能力。以2018年非洲某地区爆发的一次霍乱疫情为例，当地卫生部门利用等温多自配引发扩增技术快速检测出病原体，有效地控制了疫情的扩散。

(3)等温多自配引发扩增技术在灵敏度、特异性和稳定性方面也表现出色。该技术能够在极低浓度下检测到目标DNA序列，灵敏度可达到传统PCR的10倍以上。同时，等温多自配引发扩增技术对环境温度的适应性较强，能够在不同温度下稳定进行扩增，这对于野外或现场检测具有重要意义。例如，2019年一项关于等温多自配引发扩增技术在野生动物样品中检测病原体的研究显示，该技术在检测狂犬病病毒时具有极高的灵敏度，即使在病毒含量极低的样本中也能准确检测出来。

二、研究方法

1.等温多自配引发扩增技术原理

(1)等温多自配引发扩增技术（isothermalamplification）是一种在恒温条件下进行的DNA扩增方法，它摒弃了传统PCR所需的热循环步骤。该技术利用一系列酶和分子伴侣，如DNA聚合酶、核酸内切酶和连接酶等，在单一温度下实现DNA的复制。其中，一种称为重组DNA聚合酶（RDP）的酶在等温多自配引发扩增技术中发挥着关键作用。以2015年发表的一项研究为例，研究人员使用RDP酶在37°C的恒温条件下，成功地将DNA扩增了106倍。

(2)等温多自