《实验动物 内罗毕羊病毒荧光定量PCR检测 技术》.pdfVIP

CS65.020.30

CCSB44

YALAS

云南省实验动物学会团体标准

T/YALAS024—2025

实验动物内罗毕羊病毒荧光定量PCR检测

技术

Laboratoryanimal-DetectionofnairobisheepvirusbyfluorescentquantitativePCR

2026-01-08发布2026-01-15实施

云南省实验动物学会  发布

T/YALAS024—2025

目次

1范围2

2规范性引用文件2

3术语和定义2

4缩略语2

5试剂和引物2

6设备和材料2

7操作步骤3

7.1样品的采集、存储3

7.2样本RNA的提取3

7.3样本RNA逆转录为cDNA4

7.4试剂准备4

7.5加样4

7.6荧光定量PCR检测4

7.7结果描述及判定4

附录A（资料性）溶液配制方法5

附录B（资料性）荧光定量PCR的引物与探针6

附录C（规范性）组织和血液样本RNA提取方法7

附录D（规范性）RNA反转cDNA反应体系操作方法8

附录E（规范性）荧光定量PCR检测方法9

T/YALAS024—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由云南省实验动物学会提出。

本文件由云南省实验动物学会归口。

本文件起草单位：中国科学院昆明动物研究所、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、云南农业大学、

南京农业大学、云南省实验动物学会。

本文件主要起草人：吕龙宝、杨鸣发、王伟、高彩霞、李昌文、赵素梅、于海波、肖文娴、张贺、

杨平、夏长友、白忠彬、谢丽分、张飞燕、李倩、孙玉林、朱俊红。

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T/YALAS024—2025

实验动物内罗毕羊病毒荧光定量PCR检测技术

1范围

本文件规定了实验动物内罗毕羊病毒（NSDV）荧光定量PCR检测技术，包括试剂和引物、设备

和材料、操作步骤等内容。

本文件适用于NSDV荧光定量PCR检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

NSDV：内罗毕羊病毒（NairobiSheepDiseaseVirus）

Ct：循环阈值（CycleThreshold）

DEPC：焦炭酸二乙酯（DiethylPyrocarbonate）

PBS：磷酸盐缓冲液（Phosphatebuff