2026年卫生专业技术资格考试病理学技术(初级(师)208)专业知识难点详解.docxVIP

卫生专业技术资格考试病理学技术(初级(师)208)专业知识备考重点

考试概况

考试科目：基础知识、相关专业知识、专业知识、专业实践能力

考试形式：人机对话，100道选择题

合格标准：60分（满分100分）

核心模块：组织学技术(40%)细胞学技术(20%)特殊染色(15%)免疫组化(15%)分子病理(10%)

一、组织学技术（核心重点★★★★★）

1.1固定技术

高频考点：

固定原理：防止自溶、保持形态、便于染色

常用固定液配方：

10%中性福尔马林（4%甲醛）：金标准

95%乙醇：快速固定，但易收缩

AF液（乙醇+福尔马林）：细胞学首选

固定条件：

体积比：固定液:组织=15:1~20:1

时间：24-48小时（大标本可适当延长）

厚度：≤2-3mm

易错点：

固定不足→核结构模糊、自溶

固定过度→抗原丢失、染色不均

1.2脱水与透明

关键参数：

步骤

试剂

时间

注意事项

脱水

梯度乙醇(70%→95%→100%)

1-2h/级

低浓度时间可长，高浓度宜短

透明

二甲苯/环保透明剂

20-30min

避免过度（组织脆）

脱水失败表现：组织发白、蜡块脱块、切片碎裂

1.3浸蜡与包埋

浸蜡温度：石蜡熔点+2-3℃（通常58-62℃）

包埋要点：

组织块方向：皮肤→垂直包埋；管腔→横切

标签粘贴：与组织块方向一致

快速冷却：防止结晶

常见问题：

蜡块有气泡→浸蜡不彻底或包埋过快

组织与蜡分离→脱水不彻底

1.4切片技术

切片参数：

厚度：常规3-5μm，淋巴结2-3μm

温度：-20℃冰盒修块，4℃切片

水温：42-45℃展片，防止过度拉伸

质量判断标准：

?完整、连续、无褶皱、无气泡、无颤痕

?常见缺陷：厚薄不均、刀片划痕、组织脱落

1.5常规染色（HE染色）

标准化流程：

步骤

试剂

时间

目的

脱蜡

二甲苯

10min×2

去除石蜡

水化

梯度乙醇→水

各1-2min

复水

染核

苏木素

5-10min

染细胞核

分化

1%盐酸乙醇

数秒

去除胞浆着染

返蓝

弱碱性水/自来水

5-10min

核变蓝

染浆

伊红

1-2min

染细胞浆

质量控制要点：

苏木素需每天过滤，使用时间≤3个月

盐酸分化时间：镜下控制，“见红即止”

伊红宜淡不宜浓，避免掩盖核细节

二、细胞学技术（重点★★★★）

2.1标本采集

三大类型：

脱落细胞学：胸腹水、痰液、尿液（自然沉降法）

细针穿刺：淋巴结、甲状腺、乳腺（现场判读ROSE）

刷检细胞学：宫颈、支气管

固定液：

95%乙醇：湿固定，30min

Cytolyt液：含甲醇，效果更优

2.2制片技术

关键手法：

推片法：45°角，匀速推动，头体尾分明

离心法：XXXrpm×5min，防止细胞变形

细胞块制作：血浆-凝血酶法，提高阳性率

判读要点：细胞量、分布、染色、背景干净度

2.3快速染色

巴氏染色（宫颈筛查金标准）：

核：深蓝色/紫色

角化细胞：粉红色/橘黄色

非角化细胞：蓝绿色

迪夫快速染色：

A液：橘黄G，染胞浆

B液：EA50，染胞浆

C液：苏木素，染核

三、特殊染色技术（重点★★★）

3.1结缔组织染色

染色名称

显示成分

染色结果

临床应用

Masson三色

胶原纤维

胶原蓝/绿，肌纤维红

纤维化、肿瘤鉴别

VanGieson

胶原纤维

胶原红，肌纤维黄

简单快速

网状纤维

网状纤维

黑色

淋巴瘤分型、癌肉瘤鉴别

高频记忆：Masson蓝绿胶原，VG红胶原，网状黑

3.2微生物染色

抗酸染色：结核杆菌（红色）

石炭酸复红→酸乙醇脱色→美蓝复染

PAS染色：真菌、糖原（紫红色）

高碘酸氧化→Schiff试剂→亚硫酸冲洗

3.3色素与沉积物

染色

显示物

结果

临床意义

普鲁士蓝

含铁血黄素

蓝色

陈旧出血

刚果红

淀粉样物

红色（偏光绿）

淀粉样变

油红O

中性脂肪

红色

脂肪栓塞

四、免疫组织化学技术（重点★★★★）

4.1基本原理

ABC法：抗原→一抗→二抗→ABC复合物→DAB显色

EnVision法：抗原→一抗→二抗-HRP聚合物→DAB显色（更敏感）

4.2关键步骤

抗原修复：高压加热法（pH6.0柠檬酸盐）或酶消化法

阻断：3%H?O?阻断内源性过氧化物酶

一抗孵育：4℃过夜或37℃1h

显色：DAB（棕黄色），AEC（红色）

4.3常用抗体谱

肿瘤鉴别：

CK：癌（+）

Vimentin：肉瘤（+）

LCA：淋巴瘤（+）

S-100：黑色素瘤、神经鞘瘤（+）

乳腺癌：

ER/PR：激素受体

HER2：靶向治疗

Ki-67：增殖指数

淋巴瘤分型：

CD20：B细胞

CD3：T细胞

CD30：霍奇金

五、分子病理技术（了解★★★）

5.1PCR技术

FISH：HER2基因扩增检测（金标准）

红绿探针比值2.2为阳性