还原型谷胱甘肽试剂盒使用说明及实验原理.pdfVIP

人还原型谷胱甘肽（GSH）试剂盒使用说明

书--谷研生物公司销售

本试剂盒研究使用。

检测范围：

3ng/L-95ng/L96T

使用目的：

本试剂盒用于测定人、血浆及相关液体样本中还原型谷胱甘肽（GSH）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人还原型谷胱甘肽（GSH）水平。用纯化的人还

原型谷胱甘肽（GSH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入还原型

谷胱甘肽（GSH），再与HRP标记的还原型谷胱甘肽（GSH）抗体结合，形成抗体-抗原-

酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，

并在酸的作用下转化成最终的。颜色的深浅和样品中的还原型谷胱甘肽（GSH）呈正相

关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过曲线计算样品中人还原型谷

胱甘肽（GSH）浓度。

试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8品（160ng/L）0.5ml×1瓶

3酶标包被板12孔×8条9品稀释液1.5ml×1瓶

4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份

5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张

6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个

标本要求

1.标本后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能

马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.品的稀释：本试剂盒原倍品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

80ng/L5号品150µl的原倍品加入150µl品稀释液

40ng/L4号品150µl的5号品加入150µl品稀释液

20ng/L3号品150µl的4号品加入150µl品稀释液

10ng/L2号品150µl的3号品加入150µl品稀释液

5ng/L1号品150µl的2号品加入150µl品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、孔、

待测样品孔。在酶标包被板上品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，

然后再加待测样品10µl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽

量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此

重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗