深色有隔内生真菌(DSE)H93菌株磷酸盐转运蛋白基因克隆及功能分析.docxVIP

深色有隔内生真菌(DSE)H93菌株磷酸盐转运蛋白基因克隆及功能分析

摘要

深色有隔内生真菌（DarkSeptateEndophytes，DSE）是一类在胁迫环境中常见且定殖于植物根部的小型内生真菌，其分类和生态学功能尚不完全明确。已有研究表明，DSE可能具有多种生态学功能，能够为宿主植物提供无机元素并协助其利用有机营养物。然而，目前关于DSE吸收、转运磷机制的报道较少。磷酸盐转运蛋白（PhosphateTransporter）是参与磷酸盐转运过程的重要转运蛋白家族，广泛存在于从植物到细菌的各类生物体内，且分为高亲和力和低亲和力两类。当前，仅少数真菌物种的磷酸盐转运蛋白基因得到克隆并验证了功能，而DSE中相关研究尚未见报道。本研究以深色有隔内生真菌（DSE）中的嗜鱼外瓶霉（Exophialapinsciphila,H93）为实验材料，基于其转录组测序分析结果，克隆得到EpPT1、EpPT2、EpPT3和EpPT4四个磷酸盐转运蛋白基因的cDNA编码序列，并对其中EpPT1和EpPT2基因的功能进行了初步研究。结果表明，成功从H93菌株cDNA克隆了四个基因的编码序列并验证了基因序列；利用酵母异源表达系统对EpPT1和EpPT2基因功能研究发现，二者编码蛋白能够与缺失磷转运蛋白PHO84的酵母突变体实现互补，且在低磷条