2026高中生物课件必修三：选3第一章第2节：微生物的培养技术及应用（二）.pptxVIP

3.1.2微生物的培养技术及应用

二微生物的选择培养和计数;

筛选菌株的思路：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH

等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。;

选择培养基：是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微

生物生长的培养基。

例如，在培养基中加入抗生素可用于选择培养真菌；在培养基中加入高

浓度的盐水，可用于选择培养金黄色葡萄球菌；不加氮源的无氮培养基可用于选择培养固氮生物；不加碳源的培养基可用于选择培养自养生物；以尿素为唯—氮源的培养基可用于选择培养尿素分解菌;以纤维素为唯一碳源的培养基可用于选择培养_纤维素分解菌。;

常用方法：稀释涂布平板

①当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于稀释培养液中的一个活菌;

②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。;

1mL1mL1mL1mL

10210310?10?106

101

9mL无菌水

10g土样90mL

无菌水

38

40

42;

思考1、1g土的体积约为1_ml,

10g土加入到90ml无菌水，相当于稀释了10倍。

思考2、假如104稀释度下涂布的

3个平板的菌落数分别为42、40和

38,则1ml稀释液中的菌株数为

400,104稀释度的试管中的菌

株数为4*103,102稀释度的试管

中的菌株数为4*10?,101稀释度

的锥形瓶中的菌株数为4*10?。

101稀释度的试管中的菌株来自于

10g土，所以1g土中的菌株数为

4*106;

4×10?4×103

4×105

1mL1mL1mL1mL

1mL

4×10?

10210310?105106

4×107

101

9mL无菌水

90mL

无菌水

38

40

42;

1g土(或1ml原始菌液)中的菌株数=(C÷V)×M

C:代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数

V:代表涂布平板时所用的稀释液体积M:稀释倍数

注意事项：

①为了保证结果准确，每个稀释度，一般设置3个平板，选择菌落数在30-300的平板进行计数，并取平均值。

②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是1个菌落。因此，统计结果一般用菌落数而不是用_活菌数来表示。

③设置对照：主要目的是排除实验中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。;

微生物的数量测定;

的面积为1mm2加盖玻片后的菌液的深度为0.1mm。因此，每个大方格的容积为0.1mm3

大方格又分为两种规格。

规格I:1个大方格=16个中方格×25个小方格；

规格Ⅱ:1个大方格=25个中方格×16个小方格。

1毫升=1cm3=1000mm3

一个大方格的容积：0.1mm3=10-4毫升;

规格I规格II

如果使用规格l的血细胞计数板，先统计位于角落的4个中方格中的总菌数，求得每个中方格

的平均菌数再乘以16,就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1mL菌液中的总菌数。

如果使用规格II的血细胞计数板，先统计位于中间和四角的5个中方格中的总菌数，求得每

个中方格的平均菌数再乘以25,就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1mL菌液中的总菌数。;

2510000B

换算为1ml稀释

液中的菌数;

稀释涂布平板法

培养基

培养基上的_菌落数

计数的都是活菌

操作复杂，有一定误差

1ml原液含菌株数=平均菌落数/涂布平板所用稀

释液体积(ml)x稀释倍数;

尿素[CO(NH?),]是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后，

会被土壤中的某些细菌分解成NH?和CO?,再转化为NO?、NH?等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶 ;

样品稀释

测定土壤中细菌的

数量，一般需要

1×10?、1×