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PCR、基因测序检测流程简答试题库及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中，哪种酶用于合成DNA？

A.限制性内切酶B.Taq酶C.逆转录酶D.连接酶

答案：B

2.基因测序技术不包括以下哪种？

A.Sanger测序B.二代测序C.电泳D.三代测序

答案：C

3.PCR反应的基本步骤不包括？

A.变性B.复性C.转录D.延伸

答案：C

4.以下哪种是常用的PCR模板？

A.蛋白质B.多糖C.DNAD.脂肪

答案：C

5.基因测序的目的不包括？

A.确定碱基序列B.分析基因结构C.合成蛋白质D.检测突变

答案：C

6.PCR引物设计的原则不包括？

A.长度合适B.避免互补C.高GC含量D.特异性强

答案：C

7.二代测序相比Sanger测序的优势是？

A.读长更长B.通量更高C.成本更高D.准确性更高

答案：B

8.PCR反应体系中不需要的成分是？

A.dNTPB.引物C.核糖体D.缓冲液

答案：C

9.基因测序结果分析不包括？

A.序列比对B.基因注释C.细胞培养D.变异检测

答案：C

10.热启动PCR的目的是？

A.提高特异性B.提高产量C.降低温度D.减少引物二聚体

答案：A

多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的影响因素有（）

A.模板浓度B.引物质量C.酶活性D.反应温度E.反应时间

答案：ABCDE

2.基因测序技术包括（）

A.Sanger测序B.罗氏454测序C.Illumina测序D.PacBio测序E.Nanopore测序

答案：ABCDE

3.PCR引物设计需要考虑（）

A.长度B.碱基组成C.特异性D.引物二聚体E.退火温度

答案：ABCDE

4.基因测序前样本处理包括（）

A.DNA提取B.RNA提取C.样本纯化D.片段化E.文库构建

答案：ABCDE

5.二代测序的特点有（）

A.高通量B.低成本C.读长短D.数据量大E.应用广泛

答案：ABCDE

6.PCR产物检测方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.荧光定量D.测序E.酶切分析

答案：ABCDE

7.基因测序数据分析软件有（）

A.BLASTB.ClustalWC.SOAPdenovoD.SamtoolsE.IGV

答案：ABCDE

8.以下哪些可作为PCR模板（）

A.基因组DNAB.cDNAC.线粒体DNAD.叶绿体DNAE.病毒DNA

答案：ABCDE

9.三代测序的优势有（）

A.长读长B.直接测甲基化C.高准确性D.无需扩增E.通量高

答案：ABD

10.PCR技术的应用领域有（）

A.疾病诊断B.基因克隆C.法医鉴定D.分子进化研究E.动植物育种

答案：ABCDE

判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中引物的长度越长越好。（）

答案：错

2.基因测序只能测DNA序列。（）

答案：错

3.Taq酶具有3-5外切酶活性。（）

答案：错

4.二代测序读长比Sanger测序长。（）

答案：错

5.PCR反应中dNTP浓度越高越好。（）

答案：错

6.基因测序结果可直接用于疾病诊断。（）

答案：错

7.热启动PCR可以提高PCR反应的特异性。（）

答案：对

8.三代测序技术目前已经完全取代二代测序。（）

答案：错

9.PCR引物的GC含量应尽量均匀。（）

答案：对

10.基因测序文库构建不需要对样本进行处理。（）

答案：错

简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本步骤

答案：PCR基本步骤包括变性，将模板DNA加热至高温使其双链解开；复性，降温使引物与模板DNA互补结合；延伸，在Taq酶作用下以dNTP为原料合成新的DNA链，如此循环扩增。

2.简述基因测序样本DNA提取的一般流程

答案：首先破碎细胞释放核酸，可用物理、化学或酶解法。接着去除杂质，如蛋白质、多糖等，常用酚氯仿抽提。然后进行核酸沉淀，用乙醇等沉淀