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诺如病毒的实验室检测

（一）标本采集

多种病原体可引起急性胃肠炎聚集性或暴疫情，应充分考虑不

同病原体检测对标本采集和保存的特殊要求。因此对同一采集对象,

应按照细菌、病毒、寄生虫等不同要求，采集、分装和保存多份标本，

以备必要时做其他病原体检测、复核实验结果或进一步鉴定。采样时

需填写标本信息登记表（见附件4）。

L标本类型

⑴粪便

诺如病毒检测首选粪便标本。每份标本5g或5ml以上，直接放

置于清洁、无菌、干燥的密闭容器内。容器内不可加入任何保护剂、

培养基、去污剂或金属离子，不可稀释。

⑵肛拭子

肛拭子标本不能长期保存，且检出率低于粪便标本。肛拭子含粪

便量很低时，如检测结果呈弱阳性，结果容易被误判，导致假阴性。

采集时需注意肛拭子上应有可见的粪便，放入无菌带盖密闭采样管。

采样管中应有2ml无菌PBS缓冲液或Hank为液，液体需没过肛拭子

棉签部分，并尽快检验。

⑶呕吐物

呕吐物每份标本采集5g或5ml以上，直接放置于清洁、无菌、

干燥的密闭容器内,容器内不可加入任何保护剂、培养基、去污剂或

金属离子，不可稀释。

⑷水

目前没有水样品采集量的权威规定。怀疑水源性暴时，建议尽

量采集1升以上的水样品。桶装水、瓶装水等直接采集原包装，自来

水需要以无菌容器采集。采用膜过滤法浓缩后检验，有助于提高检出

率。

⑸食品

由于食品成分复杂、病毒含量不高，从食品样品中提取诺如病毒

RNA的回收率受限。本指南仅提供海产品、草莓、蓝莓和部分蔬菜的

参考方法。推荐采集牡蛎、海虹至少10个，三文鱼200克，扇贝、

毛蜡、文蛤等250克，草莓、蓝莓250克，生菜和芽苗菜等500克。

食品样品应置于无菌容器中，立即冷藏，当天运至实验室进行检

验。

⑹环境涂抹样

根据疫情调查需要采集疫情发机构相关场所如厨房、厕所、门

把手、玩具等环境涂抹样品。可用无菌拭子在无菌PBS里蘸湿，用力

2

涂抹待采表面（最大面积100cm）后，立即浸入核酸提取试剂盒裂解

缓冲液中（QIAamp试剂盒560ul,Genaid试剂盒400ul）。

2.标本采集对象

⑴病例

采集病例发病2.5天内的粪便、带便肛拭子或呕吐物标本。若病

例在10例以下，全部采集；病例在10例以上，至少采集10例病例

的标本。根据初步流行病学调查结果，尽量采集重点病例（如首发病

例、指示病例、住院病例、发病的食品从业人员、重点岗位的病例等）

的标本。

⑵重点人群

根据疫情调查需要，可采集食品从业人员、护理员等工作人员的

粪便、带便肛拭子标本。重点采集近期出现过胃肠不适症状、直接接

触食品的食品从业人员、直接接触早期病例的护理人员等。

3.标本保存和运输

标本在4℃冰箱可暂存12小时，之后标本应放置-20C以下冷冻

保存，需长期保存的标本应储存在-70℃冰箱，避免反复冻融。依据

《人间传染的病原微物名录》，含诺如病毒的标本属于B类包装分

类，需按照UN3373规定进行包装和手续申报，并在冷藏或冷冻条件

下运送。通常对于短途运输（1天以内），包装盒内放冰袋或冰排,

长途运输（1-2天）需用干冰。但无论短途或长途运输，均需保证冻

存标本在运输过程没有出现融化。标本送达实验室时应包装完整，包

装盒内应有未融化的冰。在运输中应避免强烈震动、重力挤压等现象。

标本保存和运送的条件应有详细记录。

（二）标本检测

为避免实验室污染，食品、水、环境样品与病人标本不能在同一

实验室检测，必须分别在独立的空间进行样品处理和检验

1.核酸检测和基因型鉴定

完整的检测流程应包括以下6个步骤，见图1

图1诺如病毒核酸