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电化学免疫生物传感器：高灵敏检测转基因蛋白Cry1Ab的创新路径

一、引言

1.1研究背景与意义

转基因技术作为全球新技术革命的重要领域，在农业领域的应用带来了巨大变革。自1996年美国率先开启全球转基因作物种植与应用的序幕，此后全球转基因作物种植面积呈现出迅猛的增长态势。截至2023年，全球转基因作物种植面积已达到2.063亿公顷，约占全球总耕地面积的13.38%，累计种植面积更是超34亿公顷。目前，已有30个国家/地区积极投身于转基因作物的种植，另外还有45个国家/地区批准进口应用，其影响力可见一斑。美国作为全球最大的转基因种植国家，转基因作物种植面积占比高达36.1%，主要种植的作物包括玉米、大豆、棉花、油菜和甜菜等；巴西紧随其后，种植面积占比32.4%，主要作物有大豆、玉米和棉花等。在全球范围内，大豆、玉米、棉花、油菜等是主要的转基因作物，其中大豆的转基因种植面积占转基因作物总面积的48.9%，位居首位，玉米和棉花分别占总面积的33.6%和11.7%。

转基因作物凭借其抗虫、抗病、耐除草剂等诸多优良特性，极大地提高了农作物的产量，有效减少了农药的使用量，为全球粮食安全做出了重要贡献。以转基因抗虫玉米为例，它能够高效抵御玉米螟、棉铃虫等害虫的侵害，显著降低害虫对农作物的损害，保障了粮食的稳定供应。然而，转基因作物的安全性问题也引发了广泛的关注和激烈的争议。由于转基因农产品对人类健康的影响尚不明确，其可能存在的潜在风险，如过敏反应、基因漂移等，使得人们对转基因作物的安全性充满担忧。为了保障消费者的知情权和选择权，维护生物多样性，同时防范潜在风险，全球已有超过40个国家实施了强制性转基因标识制度，要求对转基因产品进行明确标识。这就使得转基因产品检测成为了国际贸易、食品安全监管和质量控制中不可或缺的关键环节，其检测技术的精准性与标准化程度直接决定了监管政策能否有效实施。

在转基因作物中，转基因蛋白作为外源基因的表达产物，其检测对于评估转基因作物的安全性和监管具有至关重要的意义。转基因蛋白的存在可能会引发一系列的生态和健康问题。在生态方面，转基因蛋白可能会对非目标生物产生影响，打破原有的生态平衡。例如，转基因抗虫作物中的蛋白可能会对有益昆虫如蜜蜂、蝴蝶等产生毒性，影响它们的生存和繁殖，进而影响整个生态系统的生物多样性。在健康方面，转基因蛋白可能会引起人体的过敏反应，或者对人体的免疫系统、消化系统等产生潜在的不良影响。准确检测转基因蛋白对于保障生态环境安全和人体健康具有重要意义。通过检测转基因蛋白，可以及时发现潜在的安全隐患，采取相应的措施进行防范和管理，确保转基因作物的安全使用。

目前，常用的转基因蛋白检测方法主要包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）、侧流免疫层析试纸条（LFD）等。ELISA法具有灵敏度高、特异性强的优点，能够较为准确地检测出转基因蛋白的含量。但是，该方法需要使用昂贵的仪器设备，检测过程较为繁琐，检测时间较长，通常需要数小时甚至更长时间，难以满足快速检测的需求。LFD法虽然具有操作简单、检测速度快的优势，能够在5-10分钟内得出检测结果，适合现场快速筛查。然而，其检测灵敏度相对较低，容易出现假阳性或假阴性结果，在实际应用中存在一定的局限性。

电化学免疫生物传感器作为一种新兴的检测技术，近年来在转基因蛋白检测领域展现出了巨大的潜力。它巧妙地将免疫反应与电化学检测技术相结合，利用抗原-抗体特异性结合的原理，实现对目标物的快速、灵敏、特异性检测。与传统检测方法相比，电化学免疫生物传感器具有诸多显著的优势。它具有更高的灵敏度，能够检测到更低浓度的转基因蛋白，为早期检测和微量检测提供了可能；检测速度快，能够在短时间内完成检测，满足快速检测的需求；操作相对简单，不需要复杂的仪器设备和专业的技术人员，降低了检测成本；还具有良好的便携性，可以实现现场检测，为实际应用提供了极大的便利。开发高性能的检测转基因蛋白的电化学免疫生物传感器，对于提高转基因产品检测的效率和准确性，加强转基因作物的监管，保障食品安全和生态环境安全具有重要的现实意义。

1.2转基因蛋白Cry1Ab概述

转基因蛋白Cry1Ab来源于苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis，简称Bt），是一种重要的杀虫晶体蛋白。苏云金芽孢杆菌是一种革兰氏阳性细菌，在其生长过程中能够产生具有高度特异性杀虫活性的晶体蛋白，这些晶体蛋白被称为Cry蛋白。Cry1Ab蛋白就是其中的一种，它具有独特的结构和功能，能够对特定的害虫产生毒性作用。

在转基因作物中，Cry1Ab蛋白发挥着关键的抗虫作用。通过基因工程技术，将编码Cry1Ab蛋白的基因导入到作物基因组中，使