免疫组织化学染色技术演示文稿.pptVIP

五、吸收试验对照用过量已知相应的纯化抗原与第一抗体反应，抗体结合点全部被抗原结合，这种被抗原吸收的抗体不能再与组织内的抗原反应，故再做免疫组化染色时，结果应为阴性。六、自身对照用同一组织切片上与待检抗原无关的其它结构做对照。阴性反应与阴性结构同在一个视野中，相互印证，这本身就是对阳性反应的特异性对照。但进行科研工作中，单纯用这种对照是不科学的。必须增加如空白对照、替代对照等，才能使染色结果得到承认。现代国际上发表文章，在免疫组化染色的同时，还须有Westernblotting做相应蛋白质检测的实验结果加以证实。第63页，共92页。冰冻切片的免疫组织化学染色冰冻切片的免疫组织化学染色也是常用的技术，但一般情况下不用，因为冰冻切片操作较复杂，不易操作，要求标本必须是深低温快速冷冻，标本不如石蜡块易保存等，但优点是组织的各种抗原保存好。因此一般情况下，只有在应用石蜡切片进行免疫组化染色，包括经过抗原热修复或蛋白酶消化后，仍不能得到阳性染色结果时，才考虑使用冰冻切片染色。第64页，共92页。第四节双重免疫组织化学染色应用免疫组织化学染色方法在同一张组织切片或细胞涂片上同时或先后显示两种抗原成分，即为双重免疫标记。光镜下通过标记物或其反应生成