微生物菌种选育与基因突变研究.pdfVIP

第六章

微生物菌种的选育

第一节从自然界中分离筛选菌种

1、生产菌株

•索取或

•自己选育

➢用原有菌株进行遗传改造进行育种

➢向菌种保藏机构索取、出发菌株进行选

➢从自然界中分离菌种

从自然界中分离菌种就是从自然界微生物资源中有目的、快速、准确地选出所需

要的菌种。

从自然界中分离筛选菌种的一般步骤

二.增殖培养（富集培养）

•适用：样品中目的菌数量不够多时

•目的：提高样品中目的菌的数量和比例

•原理：通过控制营养成分或培养条件，使目的菌得以繁殖和/或非目的菌的生长受到抑制

三.纯种分离

3、厌氧性微生物的分离法

（1）去除培养基中的溶解氧，降低Eh

（2）创造无氧环境

除氧空气置换法：干燥器或厌氧培养罐

化学除氧H+O→HO(钯作催化剂）

222

➢GASPAK罐除氧：硼氢化钠、柠檬酸，碳酸氢钠化学反应产生H和CO，H与O反应生成

2222

水

（3）厌氧分离（培养）技术

▪琼脂柱技术

▪厌氧罐技术

▪厌氧手套箱技术

好氧培养

五、培养工艺条件试验与生产试验

1、摇瓶发酵条件

培养基组成、初始pH、通风量（装液量）、接种量、培养温度…

2、小型台式发酵罐发酵工艺条件

溶解氧控制，pH值控制，原料添加模式，消泡剂…

第二节突变

突变（Mutation）定义：遗传物质（或中的RNA）的分子结构或数量突

然发生了可遗传的变化。

➢突变是一种遗传的状态，是由于结构发生改变从而由原来的存在状态变为另一种存

在状态，即它的等位。

➢突变体：带有突变的细胞或

➢突变型：突变体的型或表型称为突变型，和其相对的原存在状态称为野生型。

一、突变类型

按变化范围分突变类型

(一)畸变（chromosomeaberration)数目的变化或结构发生较大片段的异常

改变。

1、数目的变化

•整倍体(euploidy)：含有完整的组

•单倍体：haploid

•二倍体：diploid

•三倍体：triploid

•四倍体：tetraploid

2、结构的变化

•deletion：

•重复duplication：

•倒位inversion：

•易位translocation：

(二)突变（genemutation）

局部座位内的变化

•点突变：只涉及分子中一对或少数几对碱基的改变。突变发生在一个范围内。

•多位点突变：突变超出一个范围。

1、碱基置换baserecement

链上的某一碱基对为另一碱基对所取代。

•转换transition：

•颠换transversion：

2、移码突变frameshiftmutation：由于一对或少数几对（不是三的倍数）核苷酸的或缺

失而造成此后一系列遗传子的阅读框发生移位错误的突变。

PheAspGluProLeuCys