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2026年实验室技术员面试题：免疫检验技师篇

一、单选题（共10题，每题2分，总计20分）

1.在ELISA检测中，若样本出现钩状效应，最可能的原因是？

A.样本中存在高浓度待测抗原

B.试剂失效

C.加样误差

D.温度不适宜

2.以下哪种方法最适合检测小分子抗原？

A.免疫荧光法

B.ELISA

C.免疫印迹法

D.流式细胞术

3.间接ELISA中，酶标二抗的作用是？

A.直接结合抗原

B.结合抗体并显色

C.固定样本

D.预防非特异性吸附

4.以下哪种缓冲液常用于WesternBlot的封闭？

A.PBS-T（含0.05%Tween-20）

B.Tris-HCl（pH7.4）

C.BSA溶液

D.甘氨酸溶液

5.以下哪种免疫层析法属于快速检测技术？

A.免疫印迹法

B.双抗体夹心法

C.侧向层析（胶体金法）

D.ELISA

6.交叉反应在免疫检测中主要影响？

A.灵敏度下降

B.特异性增强

C.结果假阳性

D.线性范围变窄

7.以下哪种方法最适合检测细胞表面抗原？

A.免疫荧光法

B.免疫组化法

C.免疫沉淀法

D.流式细胞术

8.以下哪种试剂常用于ELISA的封闭？

A.蛋白质A/G磁珠

B.甲醇

C.牛血清白蛋白（BSA）

D.SDS

9.以下哪种方法可用于检测抗体效价？

A.免疫印迹法

B.间接ELISA

C.免疫荧光法

D.免疫沉淀法

10.以下哪种现象不属于ELISA的非特异性吸附？

A.颗粒聚集

B.阴性对照显色

C.线性范围变窄

D.重复性差

二、多选题（共5题，每题3分，总计15分）

1.WesternBlot实验中，以下哪些步骤是必要的？

A.电泳分离蛋白

B.转膜

C.封闭

D.一抗孵育

E.化学发光检测

2.以下哪些因素会影响ELISA的灵敏度？

A.抗体浓度

B.样本稀释度

C.加样体积

D.底物浓度

E.温度控制

3.免疫荧光法中，以下哪些操作可减少非特异性染色？

A.优化抗体浓度

B.使用封闭液

C.滴加封片剂

D.使用同型对照

E.短时孵育

4.以下哪些方法可用于抗体纯化？

A.亲和层析（如蛋白A/G）

B.离子交换层析

C.凝胶过滤层析

D.盐析

E.透析

5.免疫印迹法中，以下哪些步骤是必要的？

A.蛋白质样品制备

B.SDS电泳

C.转膜

D.一抗孵育

E.化学发光或荧光检测

三、判断题（共10题，每题1分，总计10分）

1.ELISA检测中，酶标板底物显色越深，样本中待测物浓度越高。（×）

2.免疫荧光法只能检测细胞内抗原。（×）

3.WesternBlot中，一抗和二抗不能同时使用。（×）

4.免疫印迹法比ELISA更灵敏。（×）

5.交叉反应在所有免疫检测中都是不可接受的。（×）

6.间接ELISA比直接ELISA更适用于检测高浓度抗原。（×）

7.免疫荧光法中，DAPI染料用于标记细胞核。（√）

8.侧向层析法常用于POCT检测。（√）

9.免疫沉淀法需要高浓度的抗体才能有效结合抗原。（√）

10.WesternBlot中，电泳前需对蛋白样品进行变性处理。（√）

四、简答题（共5题，每题5分，总计25分）

1.简述ELISA的原理及其主要类型。

2.如何优化WesternBlot的蛋白上样量？

3.免疫荧光法中，如何判断非特异性染色？

4.简述免疫层析法的优缺点。

5.如何避免ELISA中的交叉反应？

五、论述题（共2题，每题10分，总计20分）

1.比较ELISA与免疫荧光法的优缺点，并说明在哪些场景下优先选择哪种方法。

2.试述免疫检测中常见的干扰因素及其解决方法。

答案与解析

一、单选题答案与解析

1.A

-钩状效应由高浓度抗原与有限量的抗体结合形成封闭免疫复合物，导致信号减弱或消失。

2.B

-ELISA对低浓度抗原的检测灵敏度较高，适合小分子抗原检测。

3.B

-间接ELISA通过二抗结合一抗，再通过酶标二抗显色，提高检测灵敏度。

4.A

-PBS-T（含0.05%Tween-20）可有效封闭非特异性位点，避免背景干扰。

5.C

-侧向层析（胶体金法）快速、便捷，常用于POCT。

6.C

-交叉反应导致抗体与非目标分子结合，产生假阳性。

7.D

-流式细胞术通过荧光标记检测细胞表面抗原，实时定量。

8.C

-BSA可封闭包被板表面，防止非特异性吸附。

9.B

-间接ELISA常用于检测抗体效价，通过样本与包被抗原结合，再用酶标二抗显色。

10.A

-颗粒聚集是酶标板质量问题，非非