QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书.pdfVIP

QuickShuttle系列转染试剂制备病毒载体使用说明书

产品描述

QuickShuttle系列转染试剂是一类具有自主知识产权、特配方的阳离子型转染试

剂，具有高效、低毒和易于使用等优点。QuickShuttle区别于常规转染试剂的两人最主要

特点是：（1）可以在细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染（立传立转）；（2）转染操作

可在一分钟内完成。因此，QuickShuttle特别适合用于快速大量制备高滴度的各种病毒载

体和假病毒载体。

重要提示

1.与常规转染试剂不同，使用QuickShuttle可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染（立

传立转），从而可节省18~24小时的转染前细胞培养时间。

2.QuickShuttle极大简化了转染操作，转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接

加入含血清的细胞培养基中进行转染，而且无需在转染后补加血清或更换培养基，整

个转染操作可在一分钟内完成。

3.立传立转、一分钟完成转染操作和高转染效率等优点使得QuickShuttle特别适合用于快

速大量制备高滴度的各种病毒载体和假病毒载体。

4.QuickShuttle能够用于慢病毒、逆转录病毒、腺相关病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒、流

感假病毒和人乳头瘤假痢毒等各种病毒载体和假病毒载体的制备。

5.QuickShuttle经过DMEM、RPMI-1640和M199等常规培养基测试，虽然在实验中推荐

使用DMEM,但有实验结果表明M199能够显著增强QuickShuttle对Ver细胞和

293FT细胞的转染效果，因此可尝试使用不同培养基对转染条件进行优化。

6.为了方便操作,推荐在75cm2和175cm2细胞瓶中使用QuickShuttle制备各种病毒载体

和假病毒载体。备注：不推荐使用各种细胞板和培养皿。

7.QuickShuttle转染试剂建议常温运输，2~8（保存（在-30。2（到常温范围内均可长时间

稳定保存），无菌取用，有效期18个月。

名称：QuickShuttle-293

2（93细胞专用QuickShuttle转染试剂）

货号：KX

含量：0.8ml

用途：用于转染各种293细胞制备病毒载体和假病毒载体。

注意事项：

1.质粒DNA：请用能够去染内毒素的方法制备高质量的质粒DNA。

2.稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒素纯水配制，高压消毒或除菌过滤。

3.培养基：经过DMEM、RPMI-I640和M199等常规培养基测试，推荐使用含5~10%牛

血清的DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。

4.对于75cm2细胞瓶，推荐每瓶培养基用量为20ml、质粒DNA用量为《Ojj、转染试剂

用量为8O|J1；对于175cm2细胞瓶，推荐每瓶培养基用量为45ml、质粒DNA用量为

90p,转染试剂用量为180印。质粒DNA和转染试剂用量可在正式实验前根据不同细

胞和不同培养基用报告基因在推荐用量附近进行优化。

5.在不同尺寸细胞瓶中进行转染，培养基、质粒DNA和转染试剂三者用量比例保持不

变。在适当少培养基用量（不少于推荐用量的一半）前提下，可按比例节约质粒

DNA和转染试剂用量。

6.对于共转染，质粒DNA总量按上述推荐量，但不同质粒DNA的比例应根据不同质粒

的作用并通过预实验确定。

7.可使用本试剂进行立传立转和标准转染（即细胞传代18~24小时后进行转染）。

8.立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至30-90%成片或刚长满。若使用生长

过老的细胞，将明显影啊立传立转的效率。备注：*常重要！

9.可尝试用本品转染贴壁性较差的其它贴壁细胞系。

使用方法

1.将新鲜消化的293细胞接种到75cm2或175cm2细胞瓶中，接种比例约为1:3（立传

立转）或1:4~5标（准转染，即细胞传代18~24小时后转染），补加完全培养基到

20ml或