病理学技术(初级(师)208)专业实践能力卫生专业技术资格考试复习策略详解.docxVIP

卫生专业技术资格考试病理学技术(初级(师)208)专业实践能力巩固重点

一、标本采集与固定

标本采集原则

及时性:尽快采集，减少自溶和腐败。

充分性:取得足以满足检验目的的标本量。

代表性:取病变最显著的部位。

无污染:避免污染（如粪便、尿液、周围正常组织）。

标识清晰:标本容器标签清晰、准确，包含患者信息、采集时间、临床诊断、标本类型等。

不同标本的正确采集方法

触诊把握的病变:大体标本应包括边缘及中心、病灶深浅各层，周围适量正常组织。

穿刺或刮取物:活检钳或活检针应获取足够组织量（至少2-3条或1mm3），注意方向性（如管腔内病变应垂直管壁取材）。

组织芯:穿刺活检获取组织芯时要保证其完整性。

体液:严格无菌操作抽取，避免血污。明确抽吸量。

尸检:全面系统，按解剖顺序取材，重点关注临床关注部位及大体可见病变。

标本固定

目的:保持组织原有形态结构、动态化学成分，抑制酶活性，杀灭细菌，为后续处理染色做好准备。

常用固定液:

10%中性缓冲福尔马林(Formalin):最常用，效果最佳。需足量（通常建议体积是组织体积的10倍以上）。

百里醇(Bouin’sfluid):用于神经组织、肌肉等。

酒精固定:适用于某些特殊染色前固定，或不适合福尔马林的标本（如石蜡包埋前）。

固定原则:

及时:采后尽快入固定液（一般要求1-2小时内）。

淹没:组织必须完全浸没在固定液中。

足量:固定液要足够，避免因浓度不足影响固定效果。

合适温度:室温（18-25℃）下固定，过冷或过热影响固定。

充分时间:不同组织、不同大小组织固定时间不同，一般小型标本12-24小时，大型或致密组织可能需48-72小时。

固定液更换:对于巨大标本，可能需要更换数次新鲜固定液。

二、标本处理与染色技术

常规组织处理流程:

登记与编号:确认标本与蜡块号、切片号的对应关系无误。

取材:常规标本修块，确定包含病灶和周围正常组织。

脱水:乙醇系列逐级脱水（如70%,80%,95%,100%），去除水分。

透明:石英或香柏油中透明，使组织透明，易于浸润。

浸蜡/包埋:浸入熔融石蜡，使其替代透明剂并凝固，将组织包埋成块。

切片:用切片机将蜡块切成4-5μm厚的切片。

脱蜡:石蜡被二甲苯或其他脱蜡剂替代。

水化:乙醇系列逐级水化，使组织重新接触水。

染色:最常用的HE染色（苏木精-伊红染色）。

脱水与透明:乙醇系列逐级脱水，石蜡透明。

封片:用中性树胶封片，盖上盖玻片。

HE染色法

原理:苏木精为碱性染料，使细胞核等碱性成分着紫蓝色；伊红为酸性染料，使细胞质、胶原纤维等酸性成分着红色。

关键步骤:固定、脱水、透明、浸蜡是影响切片质量的基础；染色时间、漂洗是影响染色效果的关键。掌握染色液配制（相对浓度）、染色时间（不同温度、不同组织所需时间不同）、水质要求等。

特殊染色

目的:显示HE染色不易显示或显示不清的结构成分，如特殊细胞器、糖原、脂类、淀粉、矿物质、嗜银/嗜碱性物质等。

常用特殊染色及其染色物质:

糖原染色（Periodicacid-Schiff,PAS染色）

脂类染色（OSI染色、油红O染色）

碱性磷酸酶染色（碱性磷酸酯酶-阿辛蓝染色）

过氧化物酶染色（过氧化酶-联苯胺染色）

网状纤维染色（银染法RegcompliedMasson-Goldnerstain）

弹性纤维染色（弹性酶染色Verhoeffstain）

肌纤维染色（嗜银染色Trichromestain）

免疫组化染色（Immunohistochemistry,IHC）：利用抗体检测组织中的蛋白质等大分子物质，需掌握ABC法、SP法原理、关键步骤（抗体稀释、孵育、显色、复染等）、注意事项（温度、时间、封闭、抗体种类选择等）。

显微镜检查与操作

的基本要求:清晰、准确、系统地进行观察。掌握显微镜的调试、使用及维护。

观察内容:细胞形态（大小、形状、核浆比例、核形、核染色质、核仁）、组织结构（细胞排列、组织成分比例、结构特征）、特殊染色结果等。

记录:绘制简明细胞或组织结构图，或用文字准确描述。

三、细胞学与组织学检查

脱落细胞学检查

采集方法:用刮片、刷子、吸管、印片等方式从体表、管腔、器官表面获取细胞。

固定:及时放入固定液（如95%乙醇、10%甲醛、含丙酮的固定液等），注意不同固定液对后续染色的要求（如巴氏染色需乙醇固定，HE需95%乙醇或甲醇固定）。

常用染色方法:

巴氏染色(Papanicolaoustain):最常用，能清晰显示细胞核、细胞质及内含物，用于宫颈癌筛查等。

HE染色:用于一般诊断性。

改良巴氏染色:提高不典型细胞显示率。

观察内容:注意寻找是否有异常细胞，如核异质（大小、形