《类胡萝卜素合成微生物底盘细胞构建与评价技术规程》.docxVIP

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SAASS

团体标准

T/SAASS339—2026

类胡萝卜素合成微生物底盘细胞构建与评价技术规程

Technicalcodeofpracticeforconstructionandevaluationofcarotenoid-synthesizingmicrobialchassiscells

2026-02-11发布2026-02-11实施

山东农学会发布

I

T/SAASS339—2026

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由山东省农业科学院提出。

本文件由山东农学会归口。

本文件起草单位：山东省农业科学院、山东佰萃生特殊医学用途配方食品有限公司、山东百沃生物科技有限公司、山东种业智科农业服务集团有限公司。

本文件主要起草人：陈高、张樱馨、宣宁、耿耘、邵亚会、边斐、杨文龙、顾林林、刘金、赵红军、靳梦潇、王晓霞。

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类胡萝卜素合成微生物底盘细胞构建与评价技术规程

1范围

本文件规定了类胡萝卜素合成微生物底盘细胞的构建流程、遗传操作要求、性能评价指标及数据记录流程。

本文件适用于利用酵母、大肠杆菌、蓝细菌和真核微藻等微生物底盘细胞进行类胡萝卜素生物合成的研究、开发与产业化应用。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T

31520

红球藻中虾青素的测定液相色谱法

GB/T

37873

合成基因质量评价通则

GB/T

41133

番茄制品中番茄红素、叶黄素、胡萝卜素含量的测定超高效液相色谱法

GB/T44471-2024生物技术基本术语

GH/T1386果蔬食品中叶黄素、玉米黄质、隐黄质和胡萝卜素的测定NY/T1736微生物肥料菌种鉴定技术规范

SN/T2667-2010转基因微生物定性检测方法

3术语和定义

下列界定的术语和定义适用于本文件。

生物元件biologicalpart

用来组装生物系统和分子机器的具有最基本生物功能的核酸或蛋白质序列。[来源：GB/T44471-2024，9.4]

宿主细胞hostcell

被选定作为生物制造平台的基础和起点、未经工程化改造的原始微生物细胞。

底盘细胞chassiscell

让设计的遗传程序在其中发挥作用的宿主细胞，具备清晰遗传背景，可通过生物元件组装进行代谢调控。

[来源：GB/T44471-2024，9.9，有修改]

代谢流metabolicflux

在特定环境条件下物质在代谢网络有关代谢途径中按一定规律进行生物代谢、转化和流动而形成的物质流。

4宿主细胞选择

基因组要求

所选宿主细胞宜具有清晰、明确的遗传背景，推荐使用已完成全基因组测序的菌株或藻株。

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4.2遗传操作要求

选择宿主细胞时，应优先考虑具备成熟、可用的生物元件，能够将外源DNA高效导入细胞内，并使其以染色体整合或质粒复制的形式稳定维持的菌株或藻株。

4.3工业适用性要求

选择具有良好工业适用性的宿主细胞，具有适应性广泛、快速生长、耐受性强等特点，如：酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)适用于脂溶性类胡萝卜素合成、大肠杆菌(Escherichiacoli)适用于水溶性衍生物合成、集胞藻PCC6803(Synechocystissp.PCC6803)和莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)适用于光合驱动型合成。

5底盘细胞构建

5.1宿主细胞准备

5.1.1宿主细胞获取

查询专业基因组数据库，获得目标菌株或藻株的保藏编号。应向专业的菌种或藻种保藏机构申请或购买，保证从正规渠道获取有质量保证的菌株或藻株。

5.1.2宿主细胞鉴定

细菌、真菌的鉴定按照NY/T1736执行。蓝细菌、真核微藻采用显微镜与分子鉴定方法相结合的手段进行鉴定：

a)显微镜鉴定方法：利用光学显微镜获