《玉米淀粉废水中酵母菌菌种分离与保藏技术规程》.docxVIP

ICSCCS

团

65.020.01B05

体

SAASS

标准

T/SAASS342—2026

玉米淀粉废水中酵母菌菌种分离与保藏技术规程

Technicalcodeofpracticefortheisolationandpreservationofyeaststrainsfromcornstarchwastewater

2026-02-11发布2026-02-11实施

山东农学会发布

T/SAASS342—2026

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由山东省农业科学院提出。

本文件由山东农学会提出并归口。

本文件起草单位：山东省农业科学院、山东爱福地生物股份有限公司、青岛和协生物科技有限公司、山东种业智科农业服务集团有限公司、赤峰市宁城县农牧局。

本文件主要起草人：陈高、康佳、邵亚会、宣宁、耿耘、边斐、张樱馨、杨文龙、魏祥圣、倪海平、赵红军、王贤举、李鹏、陈秋明。

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玉米淀粉废水中酵母菌菌种分离与保藏技术规程

1范围

本文件规定了玉米淀粉废水样品中分离、纯化、鉴定酵母菌，以及进行短期和长期保藏的技术要求、操作方法和质量控制的要求。

本文件适用于玉米淀粉废水环境中分离和保藏的酵母菌菌种。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T1736微生物肥料菌种鉴定技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

玉米淀粉废水cornstarchwastewater

在以玉米为原料生产淀粉及其衍生物的过程中，主要来自浸泡、胚芽分离、纤维洗涤等工序所产生的高浓度有机废水。

4仪器与试剂

4.1仪器设备

无菌采样器、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、恒温摇床、光学显微镜、PCR仪、电泳仪、冷冻离心机、冰箱、超低温冰箱-80℃、液氮罐、pH计、天平、移液器。

4.2培养基与试剂

YPD培养基、麦芽汁培养基、孟加拉红培养基、无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液（PBS）、甘油、二甲基亚砜（DMSO）、革兰氏染色液、美兰染色液、氯霉素、庆大霉素等，所用试剂纯度应为化学纯或以上。相关培养基配方见附录A。

5总体技术流程图

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玉米淀粉废水样品

玉米淀粉废水样品

样品预处理分离纯化

单菌落挑取与纯化

性能复筛与鉴定

废水处理效能验证

获得目标菌株

短期保藏长期保藏

建立菌种档案库

分子生物学鉴定

生理生化实验

培养与初筛

菌种保藏

图1玉米淀粉废水酵母菌株筛选与保藏整体的流程图

6样品采集与预处理

6.1采样位点

应选择在玉米淀粉生产企业废水处理站的后端能代表综合水质的位置进行采样。避免在水面浮渣层或池底沉淀物过多处采集。

6.2采样工具与容器

使用无菌玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶作为采样容器。采样前，容器应清洗干净并经121℃、20min高压蒸汽灭菌。采样时应佩戴无菌手套。

6.3采样方法

采用瞬时采样法，将采样瓶口对准水流方向，浸入液面下20cm～50cm处，打开瓶盖，让废水充满容器，严格遵循无菌操作规范，尽量减少外部污染，并确保样品充满整个容器以降低氧气残留。

6.4样品记录与标识

采样后应立即贴上标签，注明样品编号、采样地点、采样时间、采样人等信息，并填写样品登记表。样品应在4h内送达实验室进行预处理；若不能及时送达，需在4℃条件下冷藏保存与运输，且保存时间不宜超过24h。

6.5样品预处理

6.5.1初步过滤

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到达实验室后，应立即使用无菌纱布或定性滤纸对废水样品进行初步过滤，以去除样品中残留的颗粒性杂质如淀粉颗粒、纤维等。

6.5.2富集与调节

根据废水具体性状及目标酵母菌的特性，可选择以下一种或多种方法进行预处理：

a)高浓度有机废水的稀释处理：若样品化学需氧量（COD）较高，应使用无菌生理盐水进行