《盐碱地水稻根际促生菌分离与保藏技术规程》.docxVIP

ICS65.020.01CCSB05

SAASS

团体标准

T/SAASS341—2026

盐碱地水稻根际促生菌分离与保藏技术规程

Technicalcodeofpracticeforisolationandpreservationofricerhizospheregrowth-promotingbacteriainsaline-alkalisoil

2026-02-11发布2026-02-11实施

山东农学会发布

T/SAASS341—2026

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由山东省农业科学院提出。

本文件由山东农学会归口。

本文件起草单位：山东省农业科学院、施可丰化工股份有限公司、山东爱福地生物股份有限公司、赤峰市农牧技术推广中心、山东种业智科农业科技服务有限公司。

本文件主要起草人：宣宁、陈高、邵亚会、耿耘、张樱馨、边斐、杨文龙、康佳、山东廷、苑喜军、巩俊花、魏祥圣、赵红军、解晓梅、李鹏、查娜，鲍新玥，聂大杭。

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盐碱地水稻根际促生菌分离与保藏技术规程

1范围

本文件规定了盐碱地水稻根际土壤样品采集以及促生菌分离、纯化、功能鉴定、菌种保藏及记录建档的技术流程。

本文件适用于盐碱地水稻根际促生菌分离、筛选、鉴定与保藏。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T46408-2025微生物资源机构数据管理及发布规范

NY/T1121.1土壤检测第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存

NY/T1121.2土壤检测第2部分：土壤pH的测定

NY/T1121.16土壤检测第16部分：土壤水溶性总盐量的测定

NY/T1736-2009微生物肥料菌种鉴定技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

水稻根际rhizosphereofrice

水稻根系周围、受根系活动强烈影响的微域土壤环境，通常指距根表数毫米范围内的土壤。

根际促生菌plantgrowthpromotingrhizobacteria

能够直接或间接促进植物生长、增加作物产量、防治病虫害、且能在水稻根系稳定定植的包括细菌、放线菌、丝状真菌、酵母菌、蓝藻等在内的根际微生物。

4仪器与试剂

主要仪器

高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、恒温振荡培养箱、恒温培养箱、pH计、光学显微镜、PCR仪、电泳仪、冷冻离心机、-80℃超低温冰箱、液氮罐、原子吸收光谱仪、分光光度计等。实验室生物安全条件应符合GB19489的要求。

主要试剂

培养基：LB培养基、R2A培养基、硅酸盐培养基、有机磷水解培养基、无机磷水解培养基、阿须贝无氮培养基、CAS检测培养基、ACC脱氨酶检测培养基（含ADF培养基和DF培养基）、产IAA检测培养基等，所用试剂纯度应为化学纯或以上。相关培养基配方参见附录A。

5操作流程

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盐碱地水稻根际土样采集

盐碱地水稻根际土样采集

样品预处理与稀释

选择性培养与分离

纯化与鉴定

促生潜能筛查

高效促生菌株扩大培养

长期保藏

(甘油管、冷冻干燥、液氮)

菌种信息记录与建档

短期保藏

(斜面、半固体穿刺)

图1盐碱地水稻根际促生菌分离与保藏操作流程

6技术要点

6.1样品采集

6.1.1采样时间

于水稻分蘖盛期或抽穗期进行。

6.1.2采样方法

选择长势均匀的植株，按“S”形或五点法进行取样。在盐碱地取样时，需同时依据土壤的盐度(用电导率EC值衡量)和碱度(用pH值衡量)来综合判断土壤类型并调整根团采集深度：对于重度盐碱地(EC0.8dS/m或pH9.0),采集深度为5cm~10cm;对于中度盐碱地(EC0.4dS/m～0.8dS/m或pH值8.0~9.0),采集深度为3cm~5cm;对于轻度或非盐碱地则可按常规采集。若土壤同时存在盐化与碱化，以更高的危害等级为准。用铲子挖出完整根团，立即存放于4℃冰盒中运回实验室，在超净工作台内用灭菌刀