《淡水生物环境DNA监测技术规范 大型底栖动物》（DB36T 2219-2026）.docxVIP

ICS13.020CCSZ06

DB36

江西省地方标准

DB36/T2219—2026

淡水生物环境DNA监测技术规范大型底栖动物

TechnicalspecificationsformonitoringenvironmentalDNAoffreshwaterorganisms—Macrozoobenthos

2026-02-02发布2026-08-01实施

江西省市场监督管理局发布

I

DB36/T2219—2026

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4试剂和器材 2

5样品采集 3

6PCR扩增、测序与分析 4

7质量控制与评价指标 5

II

DB36/T2219—2026

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由江西省生态环境厅提出并归口。

本文件起草单位：江西省生态环境科学研究与规划院、中国科学院水生生物研究所、华中农业大学。

本文件主要起草人：姚娜、张园眼、张萌、龚迎春、周琼、王军、冯兵、雷婷、徐茹、任俊达、赵子豪、张玉、朱佳琪、吴俊伟、李铭书、王强、刘赋斌、杨东、夏威、付思懿、肖火青、王启沛、甘甜、许曦、胡林凯、甘一民、李志龙、蔡鑫、万禀颢。

DB36/T2219—2026

1

淡水生物环境DNA监测技术规范大型底栖动物

1范围

本文件规定了利用环境DNA（eDNA）宏条形码技术监测大型底栖动物的试剂和器材、样品采集、PCR扩增、测序与分析、质量控制与评价指标。

本文件适用于湖泊、水库、河流和地下水的大型底栖动物监测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T

29859

生物信息学术语

GB/T

30989

高通量基因测序技术规程

GB/T

35537

高通量基因测序结果评价要求

GB/T

37874

核酸提取纯化方法评价通则

GB/T

40226

环境微生物宏基因组检测高通量测序法

HJ494水质采样技术指导

HJ1295水生态监测技术指南河流水生生物监测与评价（试行）

3术语和定义

GB/T29859和GB/T30989界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1

大型底栖动物macrozoobenthos

生活史的全部或至少一个时期栖息于河流、湖泊、水库、地下水的水底表面或底部基质中的大型动物。本文件特指不能通过500um筛网的大型底栖无脊椎动物，主要包括节肢动物门（Arthropoda）、软体动物门（Mollusca）、环节动物门（Annelida）、部分扁形动物门（Platyhelminthes）等动物。

3.2

引物primer

在DNA复制过程中，结合于模板链上并作为复制延伸的起始位点和/或终止位点的，具有一定长度和顺序的寡核苷酸链。

DB36/T2219—2026

2

3.3

聚合酶链式反应polymerasechainreaction（PCR）

一种体外酶促合成特异DNA片段的分子技术，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便省时等特点。3.4

环境DNAenvironmentalDNA（eDNA）

通过从环境介质（水、土壤、沉积物等）或混合生物组织中提取的DNA。

3.5

DNA宏条形码DNAmetabarcoding

利用高通量测序获取环境介质（如水、沉积物、土壤、空气等）或混合生物组织中的特定DNA片段，根据物种间特定DNA序列差异识别物种，获取物种组成和群落结构。

3.6

线粒体细胞色素c氧化酶I序列mitochondrialcytochromecoxidaseI(COI)sequence

后生动物线粒体基因组上的线粒体细胞色素c氧化酶I对应的DNA序列。

3.7

DNA宏条形码技术DNAmetabarcodingtechnology

利用高通量扩增子测序获取环境DNA