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离子交换剂的选择、处理和保存

1.离子交换剂的选择

离子交换剂的种类很多，离子交换层析要取得较好的效果首先要选择

适的离子交换剂。

首先是对离子交换剂电荷基团的选择，确定是选择阳离子交换剂还是选

择阴离子交换剂。这要取决于被分离的物质在其稳定的pH下所带的电荷，

如果带正电，则选择阳离子交换剂；如带负电，则选择阴离子交换剂。例如

待分离的蛋白等电点为4,稳定的pH范围为6—9,由于这时蛋白带负电，

故应选择阴离子交换剂进行分离。强酸或强碱型离子交换剂适用的pH范围

广，常用于分离一些小分子物质或在极端pH下的分离。由于弱酸型或弱碱

型离子交换剂不易使蛋白质失活，故一般分离蛋白质等大分子物质常用弱酸

型或弱碱型离子交换剂。

其次是对离子交换剂基质的选择。前面已经介绍了，聚苯乙烯离子交换

剂等疏水性较强的离子交换剂一般常用于分离小分子物质，如无机离子、氨

基酸、核甘酸等。而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换剂亲水性较强，适

于分离蛋白质等大分子物质。一般纤维素离子交换剂价格较低，但分辨率

和稳定性都较低，适于初步分离和大量制备。葡聚糖离子交换剂的分辨率和

价格适中，但受外界影响较大，体积可能随离子强度和pH变化有较大改变，

影响分辨率。琼脂糖离子交换剂机械稳定性较好，分辨率也较高，但价格较

贵。

另外离子交换剂颗关立大小也会影响分离的效果。离子交换剂颗粒一般呈球

形，颗粒的大小通常以目数(mesh)或者颗粒直径(m)来表示，目数越大

M

表示直径越小。前面在介绍交换容量时提到了一些关于交换剂颗粒大小、孔

隙的选择。另外离子交换层析柱的分辨率和流速也都与所用的离子交换剂颗

粒大小有关。一般来说颗粒小，分辨率高，但平衡离子的平衡时间长，流速

慢；颗粒大则相反。所以大颗粒的离子交换剂适于对分辨率要求不高的大

规模制备性分离，而小颗粒的离子交换剂适于需要高分辨率的分析或分离。

这里特别要提到的是，离子交换纤维素目前种类很多，其中以DEAE-纤

维素（二乙基氨基纤维素）和CM-纤维素（竣甲基纤维素）最常用，它们在

生物大分子物质（蛋白质，酶，核酸等）的分离方面显示很大的优越性。一

是它具有开放性长链和松散的网状结构，有较大的表面积，大分子可自由通

过，使它的实际交换容量要比离子交换树脂大的多；二是它具有亲水性，芯

蛋白质等生物大分子物质吸附的不太牢，用较温和的洗脱条件就可达到分离

的目的，因此不致引起生物大分子物质的变性和夫活。三是它的收率高。

所以离子交换纤维素已成为非常重要的一类离子交换剂。

2.离子交换剂的处理和保存

离子交换剂使用前一般要进行处理C干粉状的离子交换剂首先要进行膨

化，将干粉在水中充分溶胀，以使离子交换剂颗粒的孔隙增大，具有交换活

性的电荷基团充分暴露出来。而后用水悬浮去除杂质和细小颗粒。再用酸碱

分别浸泡，每一种试剂处理后要用水洗至中性，再用另一种试剂处理，最后

再用水洗至中性，这是为了进一步去除杂质，并使离子交换剂带上需要的平

衡离子。市售的离子交换剂中通常阳离子交换剂为Na型（即平衡离子是Na

离子），阴离子交换剂为C1型，因为通常这样比较稳定。处理时一般阳离子

交换剂最后用碱处理，阴离子交换剂最后用酸处理。常用的酸是HC1,碱是

NaOH或再加一定的NaCL这样处理后阳离子交换剂为Na型，阴离子交换

剂为。型。使用的酸碱浓度一般小于0.5mol/L,浸泡时间一般30min。处

理时应注意酸碱浓度不宜过高、处理时间不宜过长、温度不宜过高，以免离

子交换剂被破坏。另外要注意的是离子交换剂使用前要排除气泡，否则会影

响分离效果。

离子交换剂的再生是指对使用过的离子交换剂进行处理，使其恢复原来

性状的