基因工程 考试 重点 噬菌体载体.pdfVIP

第二章DNA重组克隆的单元操作

练习题

噬菌体载体(练习题)

一、填空题

1．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。

2．第一个报道的全测序的单链DNA噬菌体是φX174，DNA长5386个碱基对，共个

基因，为一环状DNA分子，基因组的最大特点是。

3．λ噬菌体的基因组DNA为kb，有多个基因。在体内，它有两种复制

方式，扩增时(早期复制)按复制，成熟包装(晚期复制)则是按复制。它有一个复

制起点，进行向复制。λ噬菌体的DNA既可以以线性存在又可以环状形式存在，并

且能够自然成环。其原因主要是在λ噬菌体线性DNA分子的两端各有一个个碱基组

成的天然黏性末端。这种黏性末端可以自然成环。成环后的黏性末端部位就叫做位点。

4．根据噬菌体的包装能力，将野生型λ噬菌体的基因组DNA改造成插入型载体，该载体

的最小分子大小约为kb，插入的外源片段最大不超过kb。

5．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是和。

6．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来

自，最大的克隆片段达到kb。

7．有两类改造型的λ噬菌体载体，即插入型和取代型。从酶切点看，插入型为个，

取代型为个。

8．野生型的丸噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1)(2)(3)。

9．M13单链噬菌体的复制分为三个阶段：(1)(2)(3)。

10．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来

自噬菌体的主要结构是。

11．M13单链噬菌体基因2和基因4之间的IG区有三个最重要的功能，即(1)

(2)(3)。

12．野生型的M13有10个基因，分为三个功能集团，其中与复制有关的两个基因是：

和。

13．以λ噬菌体载体和黏粒载体构建文库时，起始DNA的长度是不同的，前者为

kb，后者为kb。

14．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基因

组的的范围内。

二、判断题

1.取代型载体(replacementvector)是指同一种限制性内切核酸酶在),DNA中具有两个切

点，外源DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。

2.现在最常用的pUC载体是pUCl8,它的分子量小，具有多克隆位点和易于选择的分子标

记，并且是松弛型复制。另外，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链DNA。

3.噬菌粒(phagemid)pUCll8／pUCll9载体是集质粒和丝状噬菌体有利特征于一身的载体，

既能合成单链DNA,又能合成双链DNA。

4.λ噬菌体DNA和M13单链噬菌体DNA在成熟前的DNA复制都是用滚环模型。

5.M13噬菌体每个