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咽拭标本病毒核酸提取操作

步骤内容分值实得分说明

穿脱正确穿脱防护用品2

记录原始记录的填写：考号、样品编号、收样1

时间、标本类型

取样生物安全柜中打开盖子，盖子置工作台上1非生物安全柜中

时，盖口朝上操作计0分

挤压棉拭子1

按试剂盒需要取样，并做好标记，盖好原1

盖

提取检查试剂盒是否完整，并配制RPE和1

70~75%乙醇

依次加入RLT和β-巯基乙醇，震荡混匀1

并离心

加入与RLT同体积的70~75%乙醇，并混匀1

分两次将裂解液转移到spincolumn内，1

12000rpm*15s离心

向SpinColumn内加入700微升RW1，1

12000rpm*15s离心

向SpinColumn内加入500微升RPE，1

12000rpm*15s离心

向SpinColumn内加入500微升RPE，全1

速离心1分钟

更换新的1.5毫升样品收集管，加入30~501

微升RNase-FreeWater，溶解RNA，离心

收集

清场包括垃圾清理、桌面消毒等2

结果1小时内完成1

能检测到人RNaseP得分，否则不得分2

总分20

计价11700

耗材

防护用品（含工作服、手套、鞋套、口罩等）100*20=2000

其他（如Tip、垃圾袋、锐器盒等）可实验室内部解决

试剂

RNeasyMiniKit(50人份)3500

OneStepRT-PCRkit(100T)6000

无水乙醇200

试剂配制

MDCK细胞培养液的配制

步骤内容得分实得分说明

准备清点试剂和耗材，试剂置合适的温度解2

冻、平衡

工作台消毒2

防护用品的正确穿脱2

配制（不分在DMEM中加入青霉素（终浓度1002

先后）U/ml）

在DMEM中加入链霉素（终浓度1002

µg/ml）

在DMEM中加入HEPES（终浓度2

25mM）

在DM