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植物组织中可溶性糖含量的测定

在作物的碳素营养中，作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。它们在营养中的作用主要有：

合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有

机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为NH3的受体而转化为氨基酸；

糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。由于碳水化

合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。

Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖

一、原理

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽

酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖

的定量测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测

所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成

单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水

化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，

省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将

样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发

生反应而增加了测定误差。此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，

葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类

的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。

糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为620nm，故在此波长下进行比色。

二、实验材料、试剂与仪器设备

（一）实验材料

任何植物鲜样或干样。

（二）试剂

1.80％乙醇。

2.葡萄糖标准溶液（100μg/mL）：准确称取100mg分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水并定容

至100mL，使用时再稀释10倍（100μg/mL）。

3．蒽酮试剂：称取1.0g蒽酮，溶于80%浓硫酸（将98%浓硫酸稀释，把浓硫酸缓缓加入

到蒸馏水中）1000mL中，冷却至室温，贮于具塞棕色瓶内，冰箱保存，可使用2～3周。

（三）仪器设备

分光光度计，分析天平，离心管，离心机，恒温水浴，试管，三角瓶，移液管（5、1、

0.5mL），剪刀，瓷盘，玻棒，水浴锅，电炉，漏斗，滤纸。

三、实验步骤

1.样品中可溶性糖的提取称取剪碎混匀的新鲜样品0.5～1.0g（或干样粉末5～100mg），

放入大试管中，加入15mL蒸馏水，在沸水浴中煮沸20min，取出冷却，过滤入100mL容

量瓶中，用蒸馏水冲洗残渣数次，定容至刻度。

2.标准曲线制作取6支大试管，从0～5分别编号，按表24-1加入各试剂。

表24-1蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量

管号

试剂

012345

100000001

μg/m.....

L葡24680

萄糖

溶液

（m

L）

蒸馏100000

水.....

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