T_SNLT 0029-2025 动物布鲁氏菌病检测方法联用技术规程.docxVIP

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T/SNLT

团体标准

T/SNLT0029-2025

动物布鲁氏菌检测方法联用技术规程

2025-09-18发布2025-09-22实施

石河子农产品流通协会发布

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T/SNLT0029-2025

目次

前言 I

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4缩略语 1

5生物安全要求 1

6仪器和设备 2

7材料与试剂 2

8操作前准备工作 2

9试验操作 2

9.1虎红平板凝集试验（BRT） 2

9.2试管凝集试验（SAT） 2

9.3免疫层析法（ICA) 2

9.4间接ELISA抗体检测方法（iELISA） 2

9.5竞争ELISA抗体检测方法（cELISA） 2

10检测方法联用及结果判定 2

10.1RBT与ICA方法联用 2

10.2RBT与iELISA抗体检测方法联用 2

10.3ICA与iELISA抗体检测方法联用 3

10.4RBT、ICA、iELISA抗体检测方法和SAT联用 3

10.5RBT、ICA、iELISA抗体检测方法和cELISA抗体检测方法联用 3

T/SNLT0029-2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020给出的规则起草。

本文件由第八师石河子市畜牧水产发展服务中心提出并归口。

本文件起草单位：第八师石河子市畜牧水产发展服务中心、第八师石河子市疾病预防控制中心。

本文件主要起草人：赵艳梅、窦立静、王强、刘强、宋德强、王宏伟、房文斌、万姣、蔺文龙、陈强斌、贾怀妙、任美玲、李勇军。

T/SNLT0029-2025

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动物布鲁氏菌病检测方法联用技术规程

1范围

本文件规定了动物布鲁氏菌检测方法联用技术要点和操作规范，包括生物安全要求、仪器和设备、材料和试剂、操作前准备、试验操作、检测方法联用及结果判定等内容。

本文件适用于动物布鲁氏菌病的联合检测，以提高检测的准确性和可靠性。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本使用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术

NYT1948兽医实验室生物安全要求通则

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

RBT：虎红平板凝集试验（RoseBengalTest）

SAT:试管凝集试验（SerumAgglutinationTest）

ICA：免疫层析试验（ImmunochromatographyAssay）

iELISA：间接酶联免疫吸附试验（IndirectEnzymeLinkedImmunosorbentAssay）

cELISA：竞争酶联免疫吸附试验（CompetitiveEnzymeLinkedImmunosorbentAssay）

5生物安全要求

为了保护实验室检测人员的安全，实验操作应在相应级别的生物安全实验室内进行，严格按照GB19489和NY/T1948要求执行。

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6仪器和设备

微量移液器（100μL）、无酶移液器吸头（50μL、100μL、200μL、1000μL）、一次性反应板、恒温培养箱、微量振荡器、酶标仪、液体工作站。

7材料与试剂

布鲁氏菌RBT抗原、布鲁氏菌SAT抗原、布鲁氏菌阳性对照血清和阴性对照血清、布鲁氏菌iELISA抗体检测试剂盒、布鲁氏菌cELISA抗体检测试剂盒、布鲁氏菌ICA检测试剂盒、96孔板。

8操作前准备工作

将试剂和样品恢复至室温（18-26℃),检测操作应在室温下进行。确保所有设备已校准并处于良好工作状态。

9试验操作

9.1虎红平板凝集试验（BRT）

按照GB/T18646中虎红平板凝集试验的操作方法检测。

9.2试管凝集试验（SAT）

按照GB/T18646中试管凝集实验的操作方法检测。

9.3免疫层析法（ICA)

按照布鲁氏菌病免疫层析检测试剂盒说明书的操作和结果判定