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脾提取物对树突状细胞作用

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第一部分材料与方法 2

第二部分树突状细胞分离 6

第三部分脾提取物制备 10

第四部分细胞培养条件 14

第五部分分组与处理 18

第六部分实验检测指标 21

第七部分数据统计分析 24

第八部分结果讨论 28

第一部分材料与方法

关键词

关键要点

实验动物与脾提取物的制备

1.动物模型选用健康成年小鼠，数量不少于30只，雌雄各半，体重介于18-22g之间，从SPF级动物实验中心获取。

2.脾提取物采用无菌生理盐水溶解新鲜脾脏组织，经过超声破碎、离心、过滤等步骤制备，确保提取物浓度一致且无菌。

3.提取物保存于-20℃冰箱备用，实验前30分钟内解冻，避免反复冻融影响细胞活性。

树突状细胞的体外培养

1.选择小鼠骨髓来源的单核细胞作为树突状细胞前体细胞，采用L929细胞与小鼠单核细胞共同培养的方式诱导分化。

2.使用含10%胎牛血清和抗生素的DMEM培养基，维持培养条件为37℃、5%CO2环境。

3.诱导3天后更换培养基，继续培养至第7天收获树突状细胞，通过流式细胞术检测细胞表面标志CD86和CD83的表达情况，确保细胞分化成熟。

实验分组与给药

1.树突状