两种不同离心方法对脐血单个核细胞回收率的影响.pdfVIP

两种不同离心方法对脐血单个核细

胞回收率的影响

【摘要】目的探讨不同离心条件下对

脐血血细胞回收率的影响。方法运用6%

羟乙基淀粉沉降，二次离心法可离心脐血浓

缩单个核细胞，此法具有不受标本体积大小

的影响、无细菌污染的优点。结果通过分

析两种离心方法发现制备MNC时，离心力与

MNC回收率有密切关系。结论加大离心力可

增加MNC的回收率。

【关键词】脐血;血细胞/单个核细

胞;离心法;回收率

[Abstract]ObjectiveTo

investigatetheeffectofdifferent

centrifugalmethodsonreturns-ratioof

Mononuclearcellinumbilicalcord

Aftersedimentatedwith6%hdroxethl

starch,twocentrifugatingprocesseswas

emploedtoseparateandconcentrate

MNC,whichwasnotaffectedbspecimen

volumeandnotpollutedbTherewas

significantrelationshipbetween

differentcentrifugalforceand

recoverrateofRecoverrateofMNC

willincreasebincreasingcentrifugal

force.

[Kewords]fetal

blood;mononuclear

cell;centrifugation;retrievingrate

血干细胞移植已经成为迄今为止医

治各种恶性血液病、肿瘤、遗传性疾病、重

度放射病及重症联合免疫缺陷等顽症的最

有效方法之一[1,2],而采用脐血替代骨髓

及外周血进行HSCT已成为近10年来HSCT

领域的最重大进展之一[2,3]。最初的脐血

HSCT使用的均为未经分离的全血，这种全脐

血移植虽然能减少血干/祖细胞的损耗，

但因含有大量的红细胞等成熟血细胞，不但

给冷冻保存带来困难，同时还可能会给移植

病人成严重的不良后果。因此，对脐血库

来讲，高效快速分离脐血血细胞，对单个

核细胞进行分离浓缩,最大限度地降低其终

体积显得尤为重要。这不仅涉及到尽量减低

血细胞的丢失问题，而且还牵涉到降低脐

血库库容的成本问题。所以，探索出一种行

之有效理想的分离方法就成了该领域研究

的热点。为此，笔者做了一些探索，现报告

如下。

1材料与方法

材料与仪器6%羟乙基淀粉购自美国

Dupontpharma公司；无菌、无热源，含有ACD

保养液三联采血袋;落地式低温离心机；伽

细胞计数仪：2%冰醋酸结晶紫染色，计数有

核细胞数。

MNC制备方法

脐血来源40份脐血均无菌，采自深圳

市宝安区西乡人民医院妇产科，均为足月产,

胎儿无窒息。供者均为身体健康、发育良好

非高龄产妇。

分离提取将采集脐血留样1ml用计

数仪将MNC计数。参照纽约脐血库操作规程

[4]按6%HES：脐血二1：5比例加入,并

充分混匀lOmin,两次离心法。第一种方法以

10℃430r/min离心6min做第一次离心；第

二种方法以10℃460r/min离心6min做第

因此脐血细胞分离方法是建立高品质脐

血库关键技术之一；目前主要采用6%HES

沉降离心法分离。根据脐血中各种成分密度

不同，经不同离心力作用后可将血浆成分和

血细胞成分中