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分子诊断检验程序性能验证指南

1范围

本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对分子诊断相关检测程序

进行性能验证实验活动时使用，也可供医学实验室评审员在现场评审过程中参考

使用。本指南适用的分子诊断技术包括：PCR、Sanger测序、二代基因测序(NGS)、

原位杂交等，其他分子诊断使用的检验程序/方法可参考使用。

本文件适用于医学实验室采用的经确认的检验程序。

注：鉴于实际临床工作中进行分子诊断的样本类型（如进行原位杂交的样本有血液、羊

水穿刺、肿瘤组织等）以及预期用途差别较大，而不同样本类型对性能验证的要求和难易程

度差别较大，建议结合实际情况酌情选择与之相符合的性能验证方案。

2规范性引用文件

下列文件对于本指南的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅该

版本适用于本指南。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改

部分）适用于本指南。

WS/T420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》

WS/T492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》

WS/T505-2017《定性测定性能评价指南》

YY/T1261-2015《HER2基因检测试剂盒（荧光原位杂交法）》

YY/T1459-2016《人类基因原位杂交检测试剂盒》

3术语和定义

对于本指南，GB/T29791.1-2013/ISO18113-1：2009）中的定义适用。下

列术语和定义适用于本指南。

3.1可报告范围reportablerange

体外诊断医疗器械性能特征已被验证的测量区间。[GB/T29791.1-2013/ISO

18113-1：20093.46注1]

4.总则

4.1性能验证的时机

１

4.1.1检验程序常规应用前。

4.1.2任何严重影响检测系统分析性能的情况发生后，应在检测系统重新启用前

对受影响的性能进行部分性能验证。影响检测系统分析性能的情况可包括但不限

于仪器主要部件故障，仪器搬迁，设施、环境的严重失控等。

4.1.3常规使用期间，实验室可基于分析系统的稳定性，利用日常工作产生的检

验和质控数据，定期对检验程序的分析性能进行评审，应能满足检验结果预期用

途的要求。新检测系统也包含现用检测系统的任一要素（仪器、试剂、校准品等）

变更，如试剂升级、仪器更新、校准品溯源性改变等应按照新系统来进行验证。

4.2性能验证的参数

分子诊断检验程序的性能参数主要包括PCR定性和定量检测、Sanger测序、

二代基因测序(NGS)和原位杂交等。PCR定量检测选择验证的性能指标宜包括测

量正确度、测量精密度（含测量重复性和测量中间精密度）、测量不确定度、分

析特异性（含抗干扰能力）、分析灵敏度、检出限和定量限、线性区间（可报告

区间）等。PCR定性检测选择验证的性能指标宜包括方法符合率、检出限、抗干

扰能力、交叉反应等。Sanger测序和NGS选择验证的性能指标宜包括方法符合

率和检出限等。原位杂交技术应依据样本类型和预期用途，选用适宜的性能指标

进行验证，如基于完整细胞的原位杂交宜选用分析敏感性和特异性，基于组织的

宜选用方法符合率。

如果检验程序适用样本类型包括血清与血浆，实验室在临床检测时同时使用

血清与血浆，应进行血清与血浆结果一致性的验证。在肿瘤靶向基因检测时，如

果检验程序适用样本类型包括除肿瘤组织/细胞以外的样本（如血浆），应进行与

肿瘤组织结果一致性的验证。如果检验程序高度依赖人工操作或判断，应进行不

同操作人员间的验证，验证程序可参照本指南相关内容制定。

实验室应根据检测项目的预期用途以及生产制造商声明，选择对检测结果质

量有重要影响的参数进行验证。不同技术平台、样本类型以及预期用途不同时，

所需验证的性能指标宜有所侧重。

4.3性能验证的判断标准

实验室应根据临床需求选择经确认的符合预期用途的检验程序。实验室性能

验证结果的判断标准是厂商或研发者在试剂盒或检测系统说明书中声明的性能

２

指标。

5实验前准备

样本最好来自患者真实样本，尽量与厂家建立性能指标时所用材料一致。当

一份样本需进行多次试验时，对样本进行分装保存，避免反复冻融。

5.1实验操作人员